采用高效液相色谱-紫外检测法分离测定了血清中的芳香族氨基酸.采用的色谱柱为Waters Nova-Pak C18柱(4 μm,150 mm×3.9 mm i.d.),流动相为乙腈-水(体积比为6∶94,pH 3.4)溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为215 nm.血清标本经5%(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样,10 min内完成测定.探讨了流动相的pH及其有机相的比例、蛋白质沉淀剂以及检测波长等因素对分离度和灵敏度的影响.考察了其他10余种氨基酸、多巴胺类等物质对目标组分检测的干扰.该方法的日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,芳香族氨基酸测定的线性范围、检测限、回收率等均满足临床检验的要求.结果表明:该方法简便、快速、准确、可靠,适用于临床和科研工作.
参考文献
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