应用气相色谱-质谱联用技术建立了大鼠脑部神经甾体的测定方法.游离型甾体和甾体硫酸酯分两步萃取.第一步用乙酸乙酯提取游离型甾体,第二步用氯仿/2-丁醇提取甾体硫酸酯,然后经固相萃取纯化.甾体硫酸酯进行溶剂解形成游离型甾体.游离型甾体和甾体硫酸酯分别经七氟丁酸酐衍生化后进行气相色谱-质谱分析.经初步研究雄性大鼠脑部游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、黄体酮(PROG)、别孕烯醇酮(AP)和脱氢表雄酮(DHEA)的含量分别为(8.53±1.11) ng/g,( 7.01±2.60) ng/g,( 1.17±0.19 ) ng/g, (0.92±0.20) ng/g. 甾体硫酸酯孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)和脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS) 的含量分别为(5.94±2.03) ng/g和(1.93±0.92) ng/g. 每一种神经甾体都有好的线性关系和准确度.该法适合同时测定大鼠脑部游离型和结合型甾体.
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