建立了体外直接测定血管紧张素转化酶抑制剂活性的高效液相色谱分析方法.以马尿酰-组氨酰-亮氨酸为反应底物,血管紧张素转化酶为催化剂,反应所生成的马尿酸为测定指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照.使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm i.d.×150 mm,填料粒径5 μm),柱温25℃,流动相为乙腈-超纯水(体积比为25:75,各含0.05%(体积分数)三氟乙酸及0.1%(体积分数)三乙胺),流速0.5 mL/min,检测波长228 nm.在马尿酸浓度为0.005~1.000 mmol/L时,马尿酸浓度与其峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),最小检测限为0.50μmol/L;该方法对马尿酸的回收率为99.48%~105.64%,相对标准偏差(RSD)为2.20%(n=6).该方法可适用于血管紧张素转化酶抑制剂活性的体外测定,具有操作简便、精密度和准确性高的特点,为降血压药物的研制提供了方便可靠的检测手段.
参考文献
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