采用非涂层毛细管,以150 mmol/L硼酸盐缓冲液为电泳缓冲液,30 g/L聚乙二醇(PEG)20000为筛分介质,经对分离条件进行优化,成功地建立了用无胶筛分毛细管电泳检测微量蛋白质的方法.用所建立的方法测定骨桥蛋白,其批内、批间迁移时间的相对标准偏差均小于5%,回收率大于95%,被检测样品中骨桥蛋白的含量与其峰面积呈良好的线性关系(相关系数为0.996),最低检测限为0.079 g/L.考察了无血清饥饿培养对血管平滑肌细胞分泌骨桥蛋白的影响,结果表明无血清饥饿培养24 h骨桥蛋白的合成与分泌达到高峰,此后随时间延长含量随之降低,此结果与采用Western blot方法检测的结果一致.该方法具有进样量小(nL级)、检测速度快、可自动化等优点,是一种简便、快捷的检测微量蛋白质的好方法.
参考文献
| [1] | Guttman A. J Chromatogr Sci, 2003, 41(9): 449 |
| [2] | Wang Yuanchao, Xiong Yin, Zeng Zhaorui, Cheng Jieke, Shen Ping. Chinese Journal of Chromatography (王园朝, 熊音, 曾昭睿, 程介克, 沈萍. 色谱), 2001, 19(5): 439 |
| [3] | Larsen L A, Christiansen M, Vuust J, Andersen P S. Comb Chem High Throughput Screening, 2000, 3(5): 393 |
| [4] | Liu B F, Xie Q G, Lu Y T. Anal Sci, 2001, 17(11): 1 253 |
| [5] | Liu Zhimin, Han Mei, Wen Jinkun. Chinese Journal of Pathophysiology (刘智敏, 韩梅, 温进坤. 中国病理生理杂志), 2003, 19(2): 163 |
| [6] | Heller C. J Chromatogr A, 1995, 698: 19 |
| [7] | Zhu M D, Rodriguez R, Hansen D, Wehr T. J Chromatogr, 1990, 516(1): 123 |
| [8] | Han Mei, Wen Jinkun, Zheng Bin. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology (韩梅, 温进坤, 郑斌. 中国生物化学与分子生物学报), 2003, 19(2): 250 |
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