柱前衍生-超高效液相色谱法测定鱼卵中的17种氨基酸

色谱 , 2013, 31(3): 275-280. doi: 10.3724/SP.J.1123.2012.11011

柱前衍生-超高效液相色谱法测定鱼卵中的17种氨基酸

孙言春 ^1, , 许宪祝 ^2, , 徐衍岭 ^3, , 谭志军 ^4, , 牟振波 ^5, , 杜宁宁 ^6,

1.哈尔滨工业大学基础与交叉科学研究院,黑龙江哈尔滨150001;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070

2.哈尔滨工业大学基础与交叉科学研究院,黑龙江哈尔滨,150001

3.哈尔滨工业大学基础与交叉科学研究院,黑龙江哈尔滨,150001

4.中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛,266071

5.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨,150070

6.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨,150070

基金项目: 中央级非营利科研机构财政专项基金项目(2012A1004,201106,2007 HSYZX-ZH-26)

关键词：柱前衍生 , 超高效液相色谱 , 氨基酸 , 鱼卵

Determination of 17 amino acids in fish eggs by ultra performance liquid chromatography coupled with precolumn derivatization

建立了一种快速、灵敏的柱前衍生-超高效液相色谱-光电二极管阵列检测器(UPLC-PDA)测定史氏鲟(Acipenser schrenckii)、达氏鳇(Huso dauricus)和小体鲟(Acipenser ruthenus)鱼卵中17种氨基酸含量的方法.采用6.0 mol/L的盐酸水解鱼卵,提取液经低压浓缩、碱性中和,然后以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰哑胺基氨基甲酸酯(AQC)为衍生试剂在pH8.8硼酸盐缓冲溶液中衍生化.采用的色谱分离柱为Waters BEH C18柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm),流动相为30 mmol/L乙酸铵水溶液(pH3.5)和乙腈(含0.15％ (v/v)甲酸及30 mmol/L乙酸铵),梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,在260 nm波长下检测.17种氨基酸在5.0～1 000 μmol/L浓度范围内,峰面积与浓度之间的线性关系良好(r2≥0.995 0).以标准加入法测定回收率和相对标准偏差(RSD),在100、500、750μmoL/L的添加水平下,17种氨基酸的平均回收率为75.4％～ 107.3％,RSD为2.19％～ 12.3％.以3倍信噪比(S/N＞3)计方法的检出限,17种氨基酸的检出限为0.94～ 4.04 μmol/L.应用该方法检测了3种鲟鳇鱼鱼卵中的17种氨基酸含量.结果表明,该方法简便、准确、快速、可靠.

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