高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素

色谱 , 2013, 31(8): 800-803. doi: 10.3724/SP.J.1123.2013.01011

高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素

张玉琼 ^1, , 仲延龙 ^2, , 高翠云 ^3, , 董召荣 ^4, , 陈娜 ^5, , 王梅方 ^6,

1.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036

2.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036

3.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036

4.安徽农业大学农学院,安徽合肥,230036

5.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036

6.安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036

基金项目: 安徽省自然科学基金面上项目(1208085mc48) 农业部科技项目国家公益性行业(农业)科研专项(201103001,201203032,201203096)

关键词：高效液相色谱法 , 内源激素 , 小麦

Determination of five endogenous hormones in wheat by high performance liquid chromatography

Keywords： high performance liquid chromatography (HPLC) , endogenous hormones , wheat

建立了高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定小麦中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)和水杨酸(SA)5种植物内源激素.经过条件优化,选用甲醇作为样品提取溶剂.然后,经石油醚和乙酸乙酯萃取,经Sep-Pak C18小柱纯化.液相色谱的分离采用Eclipse XDB-C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)反相色谱柱；流速为1 mL/min；进样量10μL.检测器波长设置为254 nm; 14.5 min时切换到240 nm; SA洗脱后即18min时切换回254 nm.流动相A为甲醇,B为乙酸溶液(pH 3.6).梯度条件为0～7 min,20％A；7～10 min,20％A～ 28％A；10～17 min,28％A；17 ～ 19 min,28％ A～40％ A; 19 ～35 min,40％A.结果表明,小麦中各激素的分离效果理想,加标回收率达96.9％～ 98％,相对标准偏差在1.54％～ 2.29％之间.因此,该方法的建立为快速、准确地分离和测定小麦内源激素提供了可靠的方法.

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