可视化移动反应界面滴定法测定豆浆中蛋白质的含量

色谱 , 2013, 31(11): 1064-1070. doi: 10.3724/SP.J.1123.2013.04040

可视化移动反应界面滴定法测定豆浆中蛋白质的含量

郭成叶 ^1, , 王后禹 ^2, , 张雷 ^3, , 樊柳荫 ^4, , 曹成喜 ^5,

1.上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234;上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海200240

2.上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海200240

3.上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234

4.上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海200240

5.上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海200240

基金项目: 国家自然科学基金项目(21275099,21035004) 科技部重大仪器专项基金项目(2011YQ030139)

关键词：移动反应界面 , 电泳 , 滴定 , 总蛋白质含量 , 豆浆

Determination of total protein content in soya-bean milk via visual moving reaction boundary titration

Keywords： moving reaction boundary , electrophoresis , titration , total protein content , soya-bean milk

利用移动反应界面滴定(moving reaction boundary titration,MRBT)技术可视化快速准确测定豆浆中的总蛋白质含量.在MRBT中,移动反应界面(moving reaction boundary,MRB)是由阴极液中的氢氧根离子和固定在聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel,PAG)中的豆浆蛋白质分子形成,通过酸碱指示剂来指示MRB的移动.利用MRB移动速度(VMRB)与蛋白质浓度存在的函数关系建立标准曲线.配对t检验MRBT测定结果与凯氏定氮相比在95％的置信区间内无显著性差异.MRBT测定所需时间为10 min左右,线性范围为2.0 ～14.0 g/L,检出限为0.05 g/L,日内相对标准偏差小于1.90％,日间相对标准偏差小于4.39％,回收率为97.41％～99.91％.此外,三聚氰胺等非蛋白质氮(non-protein nitrogen,NPN)的添加,对豆浆中蛋白质的测定结果影响较小.

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