基于凝集素的唾液糖蛋白分离、分析及应用

色谱 , 2016, 34(12): 1234-1239. doi: 10.3724/SP.J.1123.2016.08038

基于凝集素的唾液糖蛋白分离、分析及应用

孙凯博 ^1, , 尚志 ^2, , 孙妍 ^3, , 乔智 ^4, , 刘莎 ^5, , 樊柳荫 ^6, , 曹成喜 ^7, , 肖华 ^8,

1.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

2.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

3.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

4.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

5.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

6.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

7.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

8.微生物代谢国家重点实验室,上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室,上海200240

基金项目: 国家青年千人计划项目(2013).National Natural Science Foundation of China(.21275099,21305087,21475086) "863" Program(2014AA020545) “863”项目(2014AA020545) 国家自然科学基金项目(21275099,21305087,21475086) Recruitment Program of Global Youth Experts of China(2013)

关键词：凝集素 , 糖蛋白 , 唾液 , 标志物

Lectin based salivary glycoprotein separation, analysis and its application

Keywords： lectin , glycoprotein , saliva , biomarker

唾液中的糖蛋白丰度偏低,给分离、分析带来挑战.该文采用麦胚素(WGA)和橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)分别富集糖蛋白,考察了高丰度蛋白质去除和不同酶解方式对糖蛋白分离、分析的影响.结果显示,WGA和AAL提取的唾液糖蛋白经胶内酶解可鉴定到的糖蛋白数量显著多于溶液内酶解的结果,也优于去除高丰度蛋白质后的鉴定结果.选择WGA结合胶内酶解进一步对比分析肺癌患者与健康人唾液糖蛋白的差异,通过免标记定量分析共鉴定到139个蛋白质,其中102个蛋白质存在糖基化位点,包括14个在癌症组和正常组之间存在显著差异(p＜0.05)的糖蛋白,表明该策略可用于唾液糖蛋白的有效分离、分析和癌症标志物的发现.

参考文献

[1]	Ramachandran P;Boontheung P;Xie YM;Sondej M;Wong DT;Loo JA.Identification of N-linked glycoproteins in human saliva by glycoprotein capture and mass spectrometry[J].Journal of proteome research,20066(6):1493-1503.
[2]	Deutsch O;Fleissig Y;Zaks B;Krief G;Aframian DJ;Palmon A.An approach to remove alpha amylase for proteomic analysis of low abundance biomarkers in human saliva.[J].Electrophoresis: The Official Journal of the International Electrophoresis Society,200820(20):4150-4157.

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