以氯乙酰化聚苯乙烯树脂接枝四乙烯五胺、聚乙二醇链,用于固载α-淀粉酶,研究了酶的固定化条件和固定化对酶催化性能的影响. 结果表明,PS-TEPA树脂对α-淀粉酶的吸附率达83%酶活和72%蛋白;PS-g-PEG树脂的吸附率达60%酶活和56%蛋白. 使用戊二醛未能进一步提高酶的固定化量. 酶在固定化后对底物的亲和力增加,vmax/Km值从0.024(自由酶)上升至0.035(PS-TEPA)和0.038(PS-g-PEG),最适反应温度从40 ℃(自由酶)上升为50 ℃(PS-TEPA)和60 ℃(PS-g-PEG),最适反应pH值范围从7～8(自由酶)分别拓宽为7～10(PS-TEPA)和5～8(PS-g-PEG). PS-TEPA树脂固定化酶经去离子水洗脱43 h后的残余相对酶活是717型树脂固定化酶的1.28倍,是PS树脂固定化酶的1.69倍. 酶的失活半衰期在固定化后显著延长,70 ℃下的t1/2从1 h (自由酶)延长至4.5 h(PS-TEPA)和7.5 h(PS-g-PEG).
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