闫彩珍
,
侯艳宁
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.01.003
应用气相色谱-质谱联用技术建立了大鼠脑部神经甾体的测定方法.游离型甾体和甾体硫酸酯分两步萃取.第一步用乙酸乙酯提取游离型甾体,第二步用氯仿/2-丁醇提取甾体硫酸酯,然后经固相萃取纯化.甾体硫酸酯进行溶剂解形成游离型甾体.游离型甾体和甾体硫酸酯分别经七氟丁酸酐衍生化后进行气相色谱-质谱分析.经初步研究雄性大鼠脑部游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、黄体酮(PROG)、别孕烯醇酮(AP)和脱氢表雄酮(DHEA)的含量分别为(8.53±1.11) ng/g,( 7.01±2.60) ng/g,( 1.17±0.19 ) ng/g, (0.92±0.20) ng/g. 甾体硫酸酯孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)和脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS) 的含量分别为(5.94±2.03) ng/g和(1.93±0.92) ng/g. 每一种神经甾体都有好的线性关系和准确度.该法适合同时测定大鼠脑部游离型和结合型甾体.
关键词:
气相色谱
,
质谱
,
神经甾体
,
大鼠
,
脑部
任进民
,
侯艳宁
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.002
应用高效液相色谱-质谱联用技术,以雌酮硫酸酯为内标,建立了大鼠不同脑区硫酸酯型神经甾体的测定方法.甾体分两步萃取,第一步用氯仿-仲丁醇(体积比为1∶1)提取甾体硫酸酯,然后经固相萃取纯化.溶剂解使甾体硫酸酯形成游离型甾体,然后用衍生化试剂进行衍生化,再用液相色谱-质谱分离测定.初步研究发现,雄性SD大鼠不同脑区神经甾体孕烯醇酮硫酸酯和脱氢表雄酮硫酸酯的含量分别为(4.14±1.33) ng/g和(2.26±0.76) ng/g(垂体),(1.98±1.13) ng/g和(1.80±0.93) ng/g(下丘脑),(1.08±0.48) ng/g和(0.81±0.23) ng/g(额叶皮质),(0.72±0.19) ng/g和(0.77±0.12) ng/g(海马),(1.70±0.45) ng/g和(1.44±0.71) ng/g(杏仁核),(0.92±0.27) ng/g和(0.85±0.44) ng/g(纹状体),(3.62±1.77) ng/g和(3.17±2.11) ng/g(伏隔核).每种神经甾体与内标的峰面积比和甾体浓度都有良好的线性关系,测定准确度较高.该方法可满足大鼠不同脑核团内结合型甾体的分离测定.
关键词:
高效液相色谱-质谱
,
孕烯醇酮硫酸酯
,
脱氢表雄酮硫酸酯
,
脑区
,
大鼠
