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壳聚糖即型水凝胶的理化性质、止血功能和生物相容性研究

宋福来 , 邵凯 , 刘万顺 , 韩宝芹 , 马海楠

功能材料 doi:10.3969/j.issn.1001-9731.2014.09.014

报道了壳聚糖即型水凝胶,通过红外光谱和扫描电镜对该水凝胶进行了结构分析与表征,测定了其基本理化性质,并探讨了其止血功能和生物安全性.该水凝胶的红外光谱证实了西弗碱反应的发生,证明该水凝胶是由羟丙基壳聚糖和改性海藻酸钠交联而成;SEM照片显示该水凝胶的骨架是连续均一的蜂窝状网络结构;该水凝胶成胶迅速,最短成胶时间为10 s,凝胶强度约为50 g/cm2,溶胀率约为14.7%,pH值为7.5.在大鼠肝脏损伤出血模型的止血实验中,壳聚糖水凝胶具有优异的止血功能,止血时间和出血量均优于空白对照组(P<0.01),与纤维蛋白胶组无显著性差异(P>0.05).壳聚糖水凝胶对细胞生长无明显抑制作用,其在体内降解伴随着组织炎症反应,炎症反应程度随材料的降解而减轻.

关键词: 壳聚糖 , 水凝胶 , 止血 , 降解

角膜内皮细胞载体壳聚糖基共混膜的制备及性质研究

梁晔 , 韩宝芹 , 刘万顺 , 孔晓颖

功能材料

为探讨壳聚糖基共混膜作为组织工程化角膜内皮细胞载体的可行性,制备了羟乙基壳聚糖/明胶/硫酸软骨素共混膜,并评价其性质。结果表明该膜片具有良好的透明度,适宜的含水量;细胞毒性0~1级;体外培养的角膜内皮细胞能够很好地贴附和生长于共混膜上;植入大鼠肌肉内,能够稳定地降解,诱发的炎症反应明显低于不可降解手术缝合线,说明该膜片具有良好的组织相容性,有望作为角膜细胞载体构建组织工程化角膜。

关键词: 角膜内皮细胞 , 羟乙基壳聚糖 , 载体 , 细胞相容性 , 组织相容性

N-羧甲基壳聚糖的制备及其生物相容性评价

黄攀 , 韩宝芹 , 刘万顺 , 常菁 , 董文

功能材料

以壳聚糖、乙醛酸为原料,制备了不同羧化度的水溶性N-羧甲基壳聚糖(N-CMC),进行了羧化度的测定、FTIR结构表征及生物相容性评价.结果表明,制备的5种N-CMC羧化度(D.C.)在25%~78%,FITR谱图中在1590cm-1处存在羧甲基的特征吸收峰,羧甲基化发生在壳聚糖(CTS)的2位N上.用小鼠成纤维细胞株L929评价材料的细胞毒性,在设置的62.5~5000μg/ml浓度内均具有良好的细胞相容性.动物组织相容性实验表明,相同质量N-CMC的胶体溶液比膜剂更易被组织降解吸收;在肌肉组织中其降解吸收快于皮下组织.溶血性测试表明5种羧化度样品的溶血率均<5%.表明N-CMC是一种优良的生物医用材料.

关键词: N-羧甲基壳聚糖 , 结构表征 , 羧化度 , 生物相容性

角膜组织工程支架壳聚糖基共混膜的制备及性能评价

马群 , 刘万顺 , 韩宝芹 , 杨朝忠 , 梁晔

功能材料

以脱乙酰度50%左右的水溶性壳聚糖(Cts)为主要成分,添加不同比例的明胶(gel)、硫酸软骨素(CS)共混制备出3组共混膜,测定了共混膜的透光率、含水量、细胞毒性及兔角膜基质细胞在膜上的生长活性,并评价了筛选出的共混膜在大鼠股部肌肉和兔眼前房内的组织相容性.实验结果表明,V(Cts)∶V(gel)∶V(CS)=9∶1∶0.1的共混膜具有较好的透光率,合适的含水量,细胞毒性反应为0级,而且适合兔角膜基质细胞生长贴附;植入大鼠股部肌肉和兔眼前房后炎症反应较轻.该种膜片有望作为载体支架用于构建组织工程角膜.

关键词: 水溶性壳聚糖 , 支架 , 组织相容性 , 组织工程角膜

壳聚糖基复合膜的制备及预防术后肌腱粘连功能的研究

刘文 , 常菁 , 刘万顺 , 韩宝芹

功能材料

将改性甲壳素、羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖按一定比例共混交联,流延涂布法制备3种多糖共混的壳聚糖基复合膜(CTSb复合膜).以鸡为实验动物模型.切除趾浅屈肌腱,横断趾深屈肌腱,形成趾深屈肌腱断裂动物模型.设置实验组、阳性对照组、阴性对照组和正常对照组,运用粘连等级评分、生物力学测试、组织学检测等方法对复合膜预防肌腱粘连作用进行系统评价.结果表明,CTSb复合膜组肌腱吻合口周围的粘连带、肉芽组织、胶原纤维及成纤维细胞均明显少于阴性对照组,肌腱活动度生物力学测试结果明显优于阴性对照组,说明CTSb复合膜具有良好的预防术后肌腱粘连作用.

关键词: 甲壳素 , 羧甲基壳聚糖 , 羟丙基壳聚糖 , 肌腱 , 预防粘连

PLA-PTOL-PGLU/壳聚糖自组膜

麻金海 , 刘万顺

高分子材料科学与工程

由乳酸-季戊四醇-谷氨酸(PLA-PTOL-PGLU,mLA/mPTOL/mPGLA=100/1/1)共聚物与壳聚糖(CS)通过分子间作用自组装成超分子膜.利用FT-IR和SEM对膜的表面结构进行了表征,绘制出分子组装过程的放热曲线,同时测定了自组膜的溶胀度.发现两种分子间存在强的氢键作用,分子有较好的相容性,自组膜的稳定性高,溶胀度低(37 ℃,pH=7.4).

关键词: 乳酸-季戊四醇-谷氨酸 , 壳聚糖 , 氢键 , 自组装 , , 热力学稳定 , 溶胀度

组织工程甲壳素载体支架对角膜上皮损伤修复作用的研究

隋鲜鲜 , 韩宝芹 , 刘万顺 , 职绚 , 杨朝忠

功能材料 doi:10.3969/j.issn.1001-9731.2013.16.006

探讨甲壳素载体支架培养角膜上皮细胞的可行性以及对角膜上皮的损伤修复作用.以自制的甲壳素膜片为材料,测定其厚度、含水量、透光率、机械强度、生物相容性和降解性,在甲壳素膜片上培养兔角膜上皮细胞观察其细胞相容性,构建组织工程角膜上皮,将其移植到受损的角膜上皮层,观察其修复作用.结果甲壳素膜厚度为0.20mm,含水量为81.59%,不同波长下的透光率均大于80%,干态和湿态下的载荷强度分别为6.56和29.85N,植入肌肉及皮下后炎症反应较轻,有利于细胞贴附,并能促进角膜上皮的损伤修复.该材料基本符合组织工程角膜支架材料的要求,为组织工程角膜支架的研究指明了方向.

关键词: 甲壳素 , 组织工程 , 角膜上皮细胞 , 损伤修复

防粘连壳聚糖衍生物共混膜的生物学性质研究

常菁 , 刘万顺 , 韩宝芹

功能材料

将甲壳素、羧甲基壳聚糖和羟丙基壳聚糖按一定比例共混交联,流延成膜法制备CM-C-HP共混膜.利用细胞培养、扫描电镜、HE染色等方法对共混膜的吸水率、溶胀比、细胞相容性、细胞贴附性、皮内刺激反应、急性全身毒性、体内外降解性和生物相容性进行了评价.结果表明,该共混膜具有一定吸水率,溶胀比小,无皮内刺激反应和急性全身毒性,具有良好的细胞相容性,生物可降解性和生物相容性,对成纤维细胞的生长有较强的抑制作用,是一种极具潜力的具有良好生物安全性的可吸收防粘连膜片.

关键词: 细胞相容性 , 细胞贴附性 , 生物可降解性 , 生物相容性

羟乙基与N-琥珀酰羟乙基壳聚糖的制备表征及细胞毒性试验

李敏昱 , 韩宝芹 , 刘万顺

功能材料

壳聚糖(chitosan,CTS)与氯乙醇反应制备羟乙基壳聚糖(hydroxyethyl chitosan,HECTS),并接合琥珀酸酐合成N-琥珀酰羟乙基壳聚糖(N-succinyl-hydroxyethyl chitosan,Suc-HECTS),考察琥珀酰化度的影响因素确定最适反应条件。用FT-IR对产物进行结构表征,1 H NMR测定脱乙酰度和琥珀酰化度,元素分析法测定羟乙基取代度,并评价了HECTS和Suc-HECTS的细胞毒性。结果表明HECTS与Suc-HECTS均无细胞毒性。在生物医药和药物载体方面的应用提供了一定的理论基础。

关键词: 羟乙基壳聚糖 , N-琥珀酰化羟乙基壳聚糖 , 表征 , 细胞毒性

壳聚糖基复合膜预防术后肌腱粘连机理的研究

常菁 , 刘万顺 , 韩宝芹

功能材料

采用MTT、透射电镜、凝胶电泳、流式细胞仪、生长因子测定等方法研究壳聚糖基共混糖溶液(CTSb solution)对L929成纤维细胞生长的影响,从CTSb壳聚糖基复合膜组成成分对成纤维细胞生长的影响的角度探讨复合膜预防肌腱粘连的机理.结果表明,不同浓度壳聚糖基共混糖溶液培养成纤维细胞一定时间后,MTT、透射电镜、凝胶电泳、细胞周期等指标测定结果均表明共混糖溶液对成纤维细胞生长有明显抑制作用;细胞凋亡现象明显;细胞周期发生中断,细胞被阻滞于G0-G1期;对TGF-β1和aFGF生长因子的分泌有抑制作用.该研究结果提示复合膜可通过抑制成纤维细胞生长来预防肌腱粘连的发生.

关键词: 壳聚糖 , 预防粘连 , 机理 , 成纤维细胞

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