孙瑶
,
包鹏举
,
张根葆
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.07041
建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用.以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75 μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下检测.对影响五步蛇毒PCA分离的因素(如缓冲液、离子浓度)及在37.5℃下孵育不同时间的五步蛇毒PCA与PC的相互作用进行考察.方法的检出限(以信噪比为3计)为3 mg/L,线性范围为10 ～ 300 mg/L.五步蛇毒PCA迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.56％和3.8％(n=6).等体积的五步蛇毒PCA(200 mg/L)与PC(60 mg/L)孵育5 min,其结合率达到最大,且谱图中未见有PC水解的肽链.该五步蛇毒PCA可改变PC空间构象直接激活PC.该方法简单,灵敏度和分辨率高,分析结果为今后快速检测五步蛇毒PCA及其活性提供了重要的理论依据.
关键词:
毛细管区带电泳
,
蛋白C激活剂
,
蛋白C
,
相互作用
,
五步蛇毒
