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检索条件:作者=叶明亮  

  • 论文(12)

蛋白质组衍生肽段文库用于鉴定酪蛋白激酶2的底物模体

张曼玉 , 王春丽 , 边阳阳 , 程凯 , 卫晓鸾 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00706

模体是蛋白质二级结构上的一种特征序列,激酶底物通常具有一类特征性的模体,识别底物模体对鉴定激酶底物具有重要意义.为了快速鉴定激酶底物模体,将全细胞蛋白质酶解液作为肽段文库的来源,采用碱性磷酸酶去除肽段的固有磷酸化后构建了用于筛选激酶底物模体的肽段文库.该肽段文库是大最非磷酸化肽段的混合物,将此混合肽...

关键词: 固定化金属离子亲和色谱 , 反相液相色谱-串联质谱 , 模体 , 激酶 , 肽段文库 , 蛋白质组学

赖氨酸胍基化对蛋白质组分析的影响

郑昊 , 毛家维 , 潘彦博 , 刘忠山 , 刘哲益 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.01003

赖氨酸胍基化在蛋白质组学定性和定量研究中起着重要作用,本文系统分析了胍基化前后,HeLa 细胞蛋白质经胰蛋白酶酶解产生的3种不同类型肽段的质谱鉴定情况,并探讨了不同肽段质谱响应改变的内在原因。发现赖氨酸在侧链能选择性地发生胍基化反应(其选择性达到96.8%),转化为高精氨酸,碱性增强。因此在正离子质...

关键词: 质谱 , 蛋白质组学 , 胍基化 , 肽段碎裂

开管毛细管亲和液相色谱初探

叶明亮 , 邹汉法 , 刘震 , 雷政登 , 倪坚毅

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.06.013

提出了一种新的亲和色谱模式开管毛细管亲和液相色谱.在内径为50μm的毛细管内表面键合一层三嗪染料配体,利用毛细管电泳仪的压力系统进行亲和色谱实验.采用流动相切换洗脱技术,牛血清白蛋白和溶菌酶获得了有效的分离.连续运行10次,溶菌酶的出峰时间、峰面积和峰高的相对标准偏差分别为0.1%,4.3%,3.7...

关键词: 亲和色谱 , 开管柱 , 三嗪染料 , 溶菌酶

非电荷型毛细管电色谱原位柱的色谱行为研究--阴离子表面活性剂的动态改性

吴仁安 , 邹汉法 , 叶明亮 , 熊博晖 , 倪坚毅

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.03.001

采用原位聚合的方法在毛细管中合成了非电荷型连续床电色谱原位柱,通过在电色谱流动相中加入阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)进行动态改性使其产生电渗流,考察了SDS浓度及有机改性剂浓度等因素对电渗流的影响.此类连续床柱制备容易,柱效可达14万理论塔板/m,在不同的操作条件下有良好的稳定性,连续10...

关键词: 原位聚合 , 非电荷型毛细管电色谱柱 , 阴离子表面活性剂 , 电渗流

吸附蛋白质固定相电色谱手性分离的研究

叶明亮 , 邹汉法 , 雷政登 , 吴仁安 , 倪坚毅

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.05.002

将牛血清白蛋白(BSA)吸附于强阴离子交换固定相(SAX)上用于电色谱手性分离.当SAX吸附BSA后,电渗淌度仅仅下降26.3%,而电渗流的方向没有改变.在该系统中电渗流的方向和阴离子的电泳方向一致,因而克服了一般蛋白质固定相不能分离酸性对映体的缺点.1种中性对映体安息香和4种阴离子性对映体色氨酸、...

关键词: 毛细管电色谱 , 手性分离 , 蛋白质的吸附

整体柱制备技术的新进展及其在蛋白质组学中的应用

邹汉法 , 吴明火 , 王方军 , 吴仁安 , 叶明亮

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.003

整体柱是通过在柱管内原位聚合或固化的方法制备得到的具有多孔结构的整体棒状固定相,与传统的填充柱相比,具有通透性好、传质速率快、容易制备等优点,因此在分离分析领域特别是生物分离分析中发挥的作用日益增大.整体柱的制备及应用近年来也得到了快速发展,层出不穷的新型整体柱已被广泛用于色谱高效分离分析、固相萃取...

关键词: 整体柱 , 制备 , 色谱分离 , 蛋白质组学 , 综述

毛细管整体柱在线二维分离系统应用于人体软骨的蛋白质组分析

谢沙洁 , 王方军 , 晏丹 , 周广东 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱

将已建立的 7 cm 柱长的磷酸基团强阳离子交换富集整体柱与85 cm柱长的C12烷基反相整体柱结合的在线二维分离平台应用于软骨提取蛋白的蛋白质组分析.对20 μg软骨提取蛋白的酶解产物进行14个盐梯度的分级,然后对14个馏分进行反相色谱梯度分离及串联质谱鉴定,成功地鉴定得到了 7 434 个独立肽...

关键词: 整体柱 , 在线二维分离 , 蛋白质组学 , 软骨组织

基于蛋白顺序提取法分析斯达氏油脂酵母的蛋白质组

刘宏伟 , 赵鑫 , 程凯 , 赵宗宝 , 叶明亮

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00382

斯达氏油脂酵母能在细胞内合成大量的油脂,其细胞内的脂类物质影响着蛋白质提取和后续的蛋白质组学分析.常见的一步蛋白质提取法很难从含有大量油脂的斯达氏酵母细胞中提取蛋白质,因此其蛋白质组学分析的结果较差.本文发展了顺序提取法提取斯达氏酵母中的蛋白质,并采用在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱联用技术分析其...

关键词: 在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱 , 样品前处理 , 顺序提取 , 蛋白质组分析 , 斯达氏油脂酵母

一种位点注释的蛋白质数据库用于磷酸化肽段的鉴定

程凯 , 王方军 , 边阳阳 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.10019

磷酸化修饰的分析一直是蛋白质组学研究的热点之一。在鸟枪法的蛋白质组学研究中,通过在数据库检索中设定磷酸化为可变修饰可以直接鉴定磷酸化修饰的位点。但是翻译后修饰的引入会增加数据检索空间,造成鉴定灵敏度的降低。为了解决这一问题,我们构建了一种位点注释的数据库,这种数据库包含蛋白质的磷酸化位点信息,并开发...

关键词: 蛋白质组学 , 磷酸化 , 检索空间 , 位点注释

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