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高效液相色谱-质谱联用测定胶原蛋白中的羟脯氨酸

夏金根 , 陈波 , 姚守拙

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.013

建立了一种简单、快速地测定胶原蛋白中羟脯氨酸(HYP)的高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI/MS)方法.胶原蛋白经酸水解后,以乙腈-0.05%的三氟乙酸水溶液(体积比为5:95)为流动相,以1.0 mL/min的流速在C8反相柱上进行分离.以茶氨酸为内标,利用质谱定性定量测定HYP.在电喷雾正离子模式下,对m/z 132和m/z 175离子进行选择离子监测.在11.7-117 mg/L范围内,HYP与内标物茶氨酸的峰面积比和HYP的质量浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.9993.含量测定的相对标准偏差为1.87%.回收率为97.85%~101.76%.此方法流动相简单,分析时间短且无需衍生处理,抗干扰能力强,能准确快速地测定胶原蛋白中HYP的含量.

关键词: 高效液相色谱-质谱 , 羟脯氨酸 , 胶原蛋白

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