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杜氏盐藻多糖的高效体积排阻色谱的保留特性及其分析方法的研究

戴军 , 尹鸿萍 , 陈尚卫 , 朱松 , 顾小红 , 王旻 , 汤坚

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.06.005

通过对从杜氏盐藻中提取出的不同多糖级分在高效体积排阻色谱柱(Waters Ultrahydragel Linear,7.8 mm i.d.×300 mm,2根串联)上的保留特性的考察及其分离分析条件的优化,建立了高效体积排阻色谱分析盐藻多糖平均相对分子质量及其分布的方法.结果表明:流动相中盐的种类及其浓度、pH值对3种酸性多糖级分(特别是硫酸化多糖级分PD4a)的保留行为有显著影响;在柱温为45 ℃,流速为0.9 mL/min条件下,使用0.1 mol/L的NaAc水溶液作流动相基本上能消除非特异性吸附作用及分子间缔合等因素的干扰,使各多糖级分基本以非缔合状态按立体排除机制保留和分离.在优化的色谱条件下,测得的盐藻多糖5个级分的重均相对分子质量(Mw)分别为1 548 000,33 000,67 000,424 000,10 000;测得的硫酸化多糖级分PD4a的Mw和峰面积的相对标准偏差分别为1.7%和 0.88%(n=5).

关键词: 高效体积排阻色谱 , 相对分子质量分布 , 多糖 , 杜氏盐藻

对氨基苯甲酸衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖及糖醛酸组成

郝桂堂 , 陈尚卫 , 朱松 , 尹鸿萍 , 戴军 , 曹玉华

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.01.015

建立了一种柱前对氨基苯甲酸(p-AMBA)衍生反相离子对色谱法同时分离检测多糖中单糖及糖醛酸组成的方法,筛选出适合于p-AMBA糖衍生物分离的色谱柱,考察了流动相组成对9种单糖和两种糖醛酸的p-AMBA衍生化产物的保留值及分离的影响,优化了反应温度和反应时间等衍生化条件,并应用优化的分析方法测定了螺旋藻中的单糖和糖醛酸的组成.采用紫外检测时,方法的检出限为 (2.55~13.4)×10-7mol/L;采用荧光检测时,方法的检出限为(3.38~176)×10-8 mol/L.

关键词: 柱前衍生化 , 高效液相色谱法 , 对氨基苯甲酸 , 单糖 , 糖醛酸 , 多糖

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