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反相高效液相色谱双梯度洗脱分离肽混合物及质谱分析

马岩 , 张万军 , 卫军营 , 牛明 , 林虹君 , 秦伟捷 , 张养军 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00205

复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提."鸟枪法"(Shotgun)蛋白质组学研究策略通常采用蛋白酶切、二维液相色谱-串联质谱分析肽段混合物从而鉴定蛋白质,其中高效率地分离肽段混合物是关键步骤之一.本文通过pH梯度结合有机溶剂梯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行一维液相色谱分离,按等时间间隔收集馏分并将一个梯度的前段的一个馏分与后段一个馏分混合,然后进行纳升级液相色谱-质谱联用(nanoRPLC-MS/MS)分析.将该方法应用于酵母蛋白质的分离和鉴定,实验结果为:与常规的强阳离子色谱-反相液相色谱-质谱分离鉴定方法相比,采用pH梯度结合有机相梯度的RP-HPLC-RPLC-MS分离鉴定方法多鉴定到567个酵母蛋白质(簇,含有3 035个唯一肽段);其中鉴定到肽段的pI分布范围为3.42~12.01,相对分子质量范围为587.67~3 499.79;蛋白质的pI分布范围为3.82~12.19,相对分子质量范围为3 446.55~432 905.该结果表明这种方法在复杂体系蛋白质组分离鉴定中具有明显的优势,在蛋白质组学研究中有较好的应用前景.

关键词: 反相高效液相色谱 , pH梯度洗脱 , 有机溶剂梯度洗脱 , 纳升级反相高效液相色谱-串联质谱 , 肽混合物 , 酵母

NbTi/Cu超导材料清洗废酸负压蒸发再生系统研制

贾庆功 , 张万军 , 彭常户 , 方向明

表面技术

目的:研究超导材料清洗过程中产生的废酸的处理和回收技术,实现废酸提纯回用,达到废酸液零排放的目标。方法向废酸液中配入工业浓硫酸,以提供适量浓度的环境,然后在25 kPa真空环境下进行蒸发,酸蒸气通过换热器冷凝再生,浓缩后获得的金属硫酸盐溶液进行常温下冷却结晶回收。按照配酸、蒸发、冷凝、结晶等工艺要求,设计、制作废酸再生回用的耐腐蚀过程设备,调试组成废酸再生系统,验证并优化工艺细节。结果研制的负压蒸发再生系统日处理废酸量达到9~15 t,再生酸经浓度调整后直接回用,从浓缩液中得到的硫酸盐结晶物可作为其它化工原料。结论成功实现了清洗超导材料用硝酸和氢氟酸的再生,整个环节没有污染物排放,同时设备具备造价低、运行稳定可靠、维护量小等优点。

关键词: 超导材料 , 负压蒸发 , 酸洗 , 废酸 , 再生

分离分析技术在蛋白质组学研究中应用的新进展

张养军 , 张万军 , 马岩 , 彭博 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.05.004

蛋白质组学研究的核心技术之一是分离分析方法.该综述重点评述了分离分析技术在蛋白质组学研究,即在蛋白质组表达谱构建、翻译后修饰蛋白质组研究、蛋白质复合体和相互作用研究、蛋白质组定量研究中应用的新进展,介绍了各种分离分析方法的优点、应用范围和有待解决的问题.引用文献89篇.

关键词: 蛋白质组学 , 分离技术 , 质谱 , 定量技术 , 蛋白质相互作用

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