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高效液相色谱法同时测定大豆中10种磺酰脲类除草剂的残留量

祁彦 , 占春瑞 , 张新忠 , 储晓刚

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.06.016

首次建立了同时检测大豆中10种磺酰脲类除草剂(环氧嘧磺隆、噻吩磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、氯嘧磺隆和氟嘧磺隆)多残留量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法.样品经乙腈提取、正己烷液-液分配、Florisil填充柱净化后,采用RP-HPLC-二极管阵列检测器检测(DAD)法测定,外标法定量.对样品前处理和色谱分离条件进行了详细的研究和优化.10种磺酰脲类除草剂的质量浓度在0.1~10.0 mg/L范围内其浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数为0.9996~0.9997;在0.05~2.00 mg/kg范围内,平均加标回收率为69.8%~100.7% ,相对标准偏差为1.89% ~10.43% ,方法的最低检出限为20 μg/kg(S/N=3).该方法简便、快速,净化效果较好,可同时满足进出口大豆中多种除草剂残留量的检验工作需要.

关键词: 高效液相色谱法 , 多残留分析 , 除草剂 , 磺酰脲类 , 大豆

适于双向电泳分析的苹果叶片蛋白质提取方法

曾广娟 , 李春敏 , 张新忠 , 滕云龙 , 董文轩

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.021

为了探索适用于双向电泳(2-DE)分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法.以7 cm、pH 3~10的线性固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)(12.5%的分离胶)作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色.结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点.其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹.为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18 cm、pH 3~10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在 14 000~66 000 范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析.

关键词: 双向电泳 , 蛋白质提取方法 , 苹果叶片 , 蛋白质组学分析

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