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纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析锦灯笼提取物中的蛋白质

于海洋 , 晏嘉泽 , 郭明 , 靳艳

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2012.11023

通过水提、酸沉法得到锦灯笼果实提取物,其中蛋白质含量为188 mg/g(以提取物干重计),共含有18种氨基酸,其中8种人体必需氨基酸占氨基酸总量的31%.基于鸟枪法蛋白质组学的分析方法,用纳升级反相液相色谱-串联质谱(nano-RPLC-MS/MS)系统分析锦灯笼果实提取物中蛋白质的酶解产物,结合数据库检索,共鉴定得到60种蛋白质;通过生物信息学分析,得到锦灯笼提取物中的蛋白质具有催化活性、抗氧化活性、酶调节活性、养分贮液囊活性、运输活性、结合活性六大生物活性,其中鉴定到与抗氧化相关的蛋白质有3种,为锦灯笼中蛋白质的功能性质的进一步研究奠定了基础.

关键词: 纳升级反相液相色谱-串联质谱 , 蛋白质 , 锦灯笼

反相液相色谱-串联质谱法鉴定油菜蜂花粉中的蛋白质及活性肽

郭静 , 晏嘉泽 , 郭明 , 靳艳

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12032

基于鸟枪法蛋白质组学分析方法,使用反相液相色谱-串联质谱(RPLC-MS / MS)系统分析油菜蜂花粉蛋白质的胰蛋白酶酶解产物,结合数据库检索,共鉴定到353条肽段。鉴定到的肽段所归属的蛋白质中有239个蛋白质可检索到其分子生物学功能,主要功能为结合活性、酶活性、运输活性、抑制活性等。根据血管紧张素转化酶( ACE)抑制肽活性与多肽构效之间的关系,从鉴定到的肽段中筛选并适当修饰后得到5条可能具有 ACE 抑制活性的肽段,化学合成肽段后进行了活性验证。结果表明5条肽段均具有良好的活性,其中肽段 AELDIVLALF 和 LAVN-LIPFP 表现出较高的 ACE 抑制活性,半数抑制浓度( IC50)分别为(10.65±0.50)μmol / L 和(23.66±1.08)μmol / L。该方法速度快,成本低,大大缩短了鉴定周期,达到了高通量筛选生物活性肽的目的。

关键词: 反相液相色谱-串联质谱 , 蛋白质 , 血管紧张素转化酶抑制肽 , 油菜蜂花粉

利用高效液相色谱-串联质谱追踪酸奶发酵过程中的酪蛋白磷酸肽

董浩 , 于洋 , 晏嘉泽 , 靳艳

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2017.03012

酪蛋白磷酸肽(CPPs)是酪蛋白被磷酸化的片段,具有促进矿物元素吸收、抗氧化、预防龋齿等多种生物功能.该文利用高效液相色谱-串联质谱研究牛奶经嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus debrueckii subsp.bulgaricus)发酵后CPPs的释放规律.结果表明,在内源性蛋白酶的作用下牛奶含内源性CPPs,内源性CPPs主要来源于高丰度酪蛋白αs1-CN和β-CN.经乳酸菌发酵后,在乳酸菌蛋白酶的作用下更多酪蛋白的磷酸化位点暴露而产生大量CPPs,其中含SpSpSpEE特征结构的CPPs也在酸奶中检测到,CPPs的释放与酪蛋白结构密切相关.研究结果表明,牛奶经乳酸菌发酵后释放大量含特征结构SpSpSpEE的CPPs,可提高结合矿物元素的能力,从而增强其促进人体健康的生物功能.

关键词: 高效液相色谱-串联质谱 , 酪蛋白磷酸肽 , 乳酸菌 , 酸奶

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