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定向进化提高枯草芽孢杆菌脂肪酶的活力

赵博 , 陶进 , 马吉胜 , 廉虹 , 王岩 , 常琳 , 高仁钧 , 曹淑桂

催化学报

通过定向进化的方法, 提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 的脂肪酶 (BSL2) 的活力. 经过两轮易错 PCR 以及高通量筛选, 最终获得了比活力为野生出发酶 4.5 倍的突变体 3-1B2. 基因比对结果表明, 共有两个氨基酸发生了突变. 突变酶的酶学性质研究发现, 与野生酶相比, 它的热稳定性及 pH 稳定性略有增加, 最适温度和最适 pH 值则无太大的变化. 同源模建了 BSL2 与 3-1B2 的结构, 并与底物进行了分子对接. 结果表明, 突变体 3-1B2 的结合能比野生型 BSL2 低 1.29 kcal/mol, 活性中心 Ser77 残基与底物羰基的距离也由 0.319 nm 减小为 0.278 nm, 因而加快了酶反应速度, 提高了酶活力.

关键词: 枯草芽孢杆菌 , 脂肪酶 , 易错聚合酶链反应 , 定向进化 , 分子对接

水解酶在二乙基锌与芳香醛加成反应中的应用

魏晓飞 , 郑清川 , 吉腾飞 , 赵博 , 李春元 , 王萍 , 曹淑桂 , 王智 , 王磊

催化学报

报道了水解酶催化二乙基锌与芳香醛的加成反应,对反应条件进行了优化.在最适条件(嗜热酯酶APE1547为酶源,反应温度40℃,氯仿为溶剂,4-Cl-苯甲醛为底物)下,加成反应生成的光学活性醇产率最高达78%,ee值最高可达56%.通过实验结果和分子动力学分析对可能的反应机理进行了推测.本研究进一步拓展了酶的非专一性.

关键词: 水解酶 , 二乙基锌 , 芳香醛 , 加成 , 酶 , 非专一性

反向胶束中脂肪酶催化猪油的甘油解反应

邢艳 , 褚莹 , 吴子生 , 曹淑桂

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2000.02.021

关键词: 反向胶束 , 甘油解反应 , 单脂肪酸甘油酯