杨婵
,
麦旦提
,
潘喆敏
,
薛芸
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.01004
类二十烷酸是一大类由二十碳多不饱和脂肪酸氧化产生的具有生物活性的不饱和脂肪酸,是重要的炎症因子,广泛存在于体液和组织中,调节体内众多生理和病理过程。类二十烷酸在生物体内种类众多,含量较低,并且存在大量同分异构体,因此生物体内类二十烷酸的分离和分析具有较大的挑战。本文对近5年来类二十烷酸的分析方法和其在生物样品分析中的应用进行归纳总结,重点介绍了不同分析方法的特点及其在生物样品分析中的最新进展,旨在为类二十烷酸的体内药物分析及应用研究提供参考。
关键词:
色谱
,
质谱
,
类二十烷酸
,
生物样品
,
综述
麦旦提
,
杨婵
,
薛芸
,
王彦
,
阎超
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2017.01026
以脂多糖类似物(KLA)诱导的RAW264.7细胞为研究对象,采用代谢组学研究手段,研究水飞蓟素对脂多糖诱导炎症模型中花生四烯酸代谢通路的影响.以超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用为平台,对不同浓度水飞蓟素作用下KLA诱导RAW264.7炎症细胞分泌的类二十烷酸代谢物进行定量分析,通过考察主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)的VIP值和Kruskal-Wallis秩和检验结果显著性差异(P)值筛选代谢标记物.建立了59种类二十烷酸(含15种同位素内标)在5 min内实现快速分离的液相色谱-质谱联用方法;确定了细胞存活率在58%~80%的水飞蓟素浓度为50~150 μmol/L;筛选出数据处理结果同时满足变异权重参数(VIP)值>1且结果P值<0.05的类二十烷酸代谢标记物12-OxoLeukotriene B4(12-OxoLTB4);通过分析柱状图和炎症信号通路,确定水飞蓟素借助其抗氧自由基特性发挥抗炎作用,通过抑制脂氧合酶-5 (5-LOX)的活性及阻断5-LOX代谢通路中产生氧自由基的脂质过氧化反应来减少氧自由基及过氧化物的形成.综上所述,所建立的方法能快速准确地定量分析多种类二十烷酸,并从代谢组学角度解释了水飞蓟素的抗炎机制.
关键词:
超高效液相色谱-串联质谱
,
类二十烷酸
,
同位素内标
,
水飞蓟素
,
代谢组学
,
炎症