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用疏水色谱法从猪心中快速制备高纯度的细胞色素C

姚丛 , 柯从玉 , 白泉 , 卫引茂 , 耿信笃

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.04.027

提出了一种从猪心中快速制备高纯度细胞色素C的方法.使用一种装有大颗粒疏水填料的简易型疏水色谱柱在实验室规模对细胞色素C进行了纯化,通过反相色谱、紫外光谱及铁含量对样品的纯度进行了检验.与经典方法相比,此方法纯化工艺简单、操作时间短,细胞色素C的质量回收率高,纯度好.

关键词: 疏水色谱 , 细胞色素C , 纯化 , 柱技术

用于变性蛋白质复性及同时纯化的简易型色谱柱的研制及其应用

柯从玉 , 白泉 , 耿信笃

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.04.026

研制出一种简易型色谱柱并通过装填大颗粒的疏水色谱填料对色谱柱的性能进行了考察,该柱的外形和操作如同传统的液相色谱柱,但它却在生物大分子分离方面有着和高效液相色谱相似的分辨率.另外,只要给该柱装填合适的固定相,比如疏水相互作用色谱固定相,便可用于蛋白质的复性及同时纯化.实验考察了该色谱柱的结构、操作和性能,包括柱压、柱寿命及对蛋白质的分辨率等.以溶菌酶为模型蛋白质,实验测得其在初始浓度为50.0 g/L时的质量回收率和活性回收率分别为(96.6±1.3)%和(101.1±6.0)%.这种简易型色谱柱价格低廉、易操作,且可在低压条件下对蛋白质进行纯化,表明其在对蛋白质药物的大规模纯化和复性方面有着很大的应用潜力.

关键词: 液相色谱 , 柱技术 , 溶菌酶 , 蛋白质 , 复性 , 纯化

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