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18O同位素标记定量肽段串联体蛋白质结合同位素稀释-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法

李楠楠 , 周廉淇 , 毛心丽 , 张姣 , 卫军营 , 林虹君 , 李佳斌 , 田芳 , 张养军

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03057

建立了定量肽段串联体蛋白质(concatamers of Q peptides,QconCATs)结合18O同位素标记-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法.首先对QconCAT重组蛋白质进行了纯度表征,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)表征结果表明重组蛋白质的纯度在99%以上,相对分子质量约为63.4 kDa.对QconCAT重组蛋白质酶切后的肽段混合物进行质谱分析,并经pFind和pLabel软件处理,验证了目标肽段.还考察了QconCAT重组蛋白质的酶切效率和18O标记效率,并对QconCAT蛋白质结合18O标记-同位素稀释-多反应监测质谱方法进行了评价.实验结果表明,采用该方法对腾冲嗜热厌氧菌(Thermoanaerobacter tengcongensis,TTE)中选定蛋白质的肽段进行绝对含量测定时,相对标准偏差小于20%,准确度较高,说明该方法可用于复杂生物样本中蛋白质的绝对定量.更重要的是所建方法不仅解决了细胞培养氨基酸稳定同位素标记(SILAC)技术的重标试剂价格昂贵的问题,也为定量蛋白质组学提供了一种新的方法.

关键词: 定量肽段串联体蛋白质 , 同位素稀释 , 多反应监测质谱 , 18O标记 , 蛋白质组学

新型核壳型亲水聚合物-硅胶杂化填料的合成及其在蛋白质N-糖链富集中的应用

白海红 , 范超 , 沈丙权 , 田芳 , 邓玉林 , 潘一廷 , 秦伟捷 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.11022

蛋白质的 N-糖基化修饰与多种重要的生理、病理进程密切相关,是多种重大疾病诊断标志物研究的热点。由于糖蛋白本身多是低丰度表达的蛋白质,且糖链结构具有高度微不均一性,这使得蛋白质糖基化修饰的分析具有一定的挑战。本研究利用表面引发-原子转移自由基聚合( SI-ATRP )法,以带有双键的氨基葡萄糖为单体(GMAG),成功制备了新型核壳型亲水聚合物-硅胶杂化填料(pGMAG-SiO2)。由于在硅胶表面引入致密的亲水聚合物层,该填料不仅保持了硅胶良好的机械强度,而且显著提高了其亲水性,因此非常适合作为亲水填料用于蛋白质的N-糖链富集。以麦芽七糖和鸡卵清蛋白的N-糖链为研究对象,考察了该填料对N-糖链的富集效果,并将该杂化填料成功用于人血浆中糖蛋白 N-糖链的富集检测,共鉴定了47种糖型。以上结果表明,pGMAG-SiO2填料对N-糖链具有较高的亲和性,可以用于 N-糖链的高覆盖率鉴定。

关键词: 表面引发-原子转移自由基聚合反应 , 核壳型硅胶填料 , N-糖链 , N-糖基化蛋白质

金属标记结合高效液相色谱-选择离子监测质谱的蛋白质绝对定量新方法

李佳斌 , 周廉淇 , 颜辉 , 李楠楠 , 郝斐然 , 田芳 , 张养军

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.11042

建立了金属标记结合高效液相色谱-选择性离子监测质谱(SIM)的蛋白质绝对定量新方法。实验考察了金属标记效率、金属标记的稳定性、标记后肽段的色谱保留和质谱行为、新定量方法的线性范围和准确度。实验结果表明金属标记具有标记效率高,稳定性好,色谱保留行为一致等优点。另外,金属标记-选择离子监测质谱绝对定量方法灵敏度高,其定量限低至1 fmol,线性范围为1~500 fmol,线性范围内 R2值大于0.99,具有良好的线性关系;经过测量,标准肽段的回收率为117.01%,说明该方法具有较高的准确度。将该方法应用于腾冲嗜热菌中烯醇酶蛋白的定量分析,相对标准偏差为5.47%,表明该方法的精密度高。以上结果表明该方法可以用于生物样本中的蛋白质的绝对定量分析,为比较简单的生物样本中蛋白质的绝对定量方法提供了一种新的选择。

关键词: 金属标记 , 高效液相色谱 , 选择离子监测质谱 , 蛋白质 , 绝对定量

嵌段聚(二苯基-二甲基-二苯基)硅氧烷的热性质

刘宗林 , 王庆昭 , 田芳 , 王勤 , 夏毅然

高分子材料科学与工程

用八甲基环四硅氧烷 (D4)、八苯基环四硅氧烷(P4)作为单体,N,N-二甲基甲酰胺(DMF) 作促进剂,对-双(二甲基-锂氧硅基)苯醚作引发剂,合成了嵌段聚(二苯基-二甲基-二苯基)硅氧烷(PMP).该共聚物的分子量用特性黏数表示, 用扭辫分析(TBA) 和差示扫描量热(DSC) 研究了它们的热性质.TBA曲线表明,PMP-10和PMP-40都存在两个玻璃化温度区间.DSC曲线表明,聚二甲基硅氧烷(PDMS)在350 ℃以上存在一个放热峰;PMP-10和PMP-50也都存在一个放热峰,但在400 ℃以后,各存在一个吸热峰,其峰值分别为394.45℃和523.98℃,应属于P嵌段的熔点峰,P嵌段的含量越多则熔点越高.

关键词: 嵌段聚硅氧烷 , 表征 , 热性能 , 扭辫分析 , 差示扫描量热

聚氯乙烯动态黏弹性能的时间-温度等效性研究

罗迎社 , 田芳 , 曹春 , 殷水平

材料导报 doi:10.11896/j.issn.1005-023X.2014.24.021

利用动态力学分析方法对聚氯乙烯的动态黏弹性能展开了研究,根据时间-温度等效原理建立了以55℃为参考温度的聚氯乙烯动态模量主曲线,利用分数阶Zener模型对动态模量主曲线进行了拟合分析.研究结果表明,时间-温度等效原理适用于描述一定温度范围内小应变情况下聚氯乙烯的动态黏弹性力学行为,且分数阶Zener模型能够较好地描述宽频域范围内聚氯乙烯动态模量随频率的变化规律.给出了WLF方程和Arrhenius方程的适用温度范围.

关键词: 聚氯乙烯 , 动态黏弹性能 , 时间-温度等效原理 , 分数阶Zener模型

基于逆向工程与SLS技术的环氧树脂模具制造研究

王鹏程 , 任东风 , 云雪蜂 , 左堂海 , 田芳

兵器材料科学与工程 doi:10.3969/j.issn.1004-244X.2009.04.008

研究以摩托车后视镜为初始模型,利用逆向工程和SLS快速成型技术制造环氧树脂快速模具的方法.详细叙述从模型数据采集、CAD建模、母模的制造、环氧树脂模具的制造直到产品试制的整个实验过程,证实这种基于逆向工程和SLS快速原型制造技术的环氧树脂模具制造过程及思路的可行性和优越性.

关键词: 逆向工程 , SLS , 环氧树脂模具 , Imageware

云母表面加载裂纹尖端的AFM研究

李晓冬 , 王燕斌 , 褚武扬 , 田芳 , 王琛 , 白春礼

金属学报

用AFM研究了云母表面加载裂纹尖端的原子组态结果表明,在加载裂尖前方存在一个很小的高畸变区,在它外边则是异常弹性区.云母表面裂纹尖端会发生分叉,这些小的分叉裂尖似乎是由空位团构成的

关键词: AFM , mica , atomic structure , crack tip

Sn掺杂ZnO微晶的水热法制备及表征

董厚欢 , 刘宝 , 田芳 , 崔永奎

材料导报

采用水热法合成了具有不同形貌的Sn掺杂ZnO微晶.采用XRD、SEM、UV等分析手段对试样进行了表征.实验结果表明,随着Sn掺杂比例的增加,ZnO微晶的粒度增大,大的微晶达到500 nm,小的仅为100 nmm.大的ZnO微晶为六棱锥体,显露锥面P{10 (1)1},负极面O(000 (1)),并对其生长机理进行了探讨.

关键词: ZnO微晶 , 水热法 , Sn掺杂

新型聚合物电流变材料的合成及性能

刘展鹏 , 苏琼 , 林原斌 , 文小红 , 田芳

高分子材料科学与工程

以间苯二胺,2,5-二氧环己二甲酸二甲酯为原料,经缩合、闭环、氧化等反应,制得了聚喹吖(2,3b)啶-12,14(5,7)二酮(PQA)并进行了表征;并以PQA为基础粒子制备了无水型电流变流体(ERF),研究了其电流变性能.考察了溴代二苯甲烷(BDPM)-PQA体系中粒子浓度、电场强度、剪切速率等对电流变流体性能的影响,并从聚合物粒子的分子结构特点出发,对该体系的电流变效应进行了解释;对比了不同分散介质(BDPM及硅油)对电流变效应的影响.结果表明,PQA在BDPM中具有较佳的电流变效应,当粒子的质量分数为30%,外加电场为3 kV/mm时,屈服应力达4.0 kPa.

关键词: 聚喹吖啶酮 , 电流变流体 , 合成

聚线型反式喹吖啶酮的合成及电流变性能

刘展鹏 , 田芳 , 文小红 , 苏琼 , 林原斌

高分子材料科学与工程

合成并表征了平面梯形聚合物聚喹吖(2,3-b)啶-7,14(5,12)二酮(聚线型反式喹吖啶酮,PTQA);以PTQA为基础粒子,溴代二苯甲烷(BDPM)为分散介质制备了无水型电流变流体(ERF),考察了其电流变性能.研究了体系中粒子浓度、外加电场强度、剪切速率等对电流变流体的剪切应力、屈服应力和表观黏度的影响,考察了电流变流体的温度效应.结果表明,PTQA-BDPM体系是一种性能优良的电流变流体,粒子质量分数为30%的流体室温屈服应力达到6.0 kPa(3 kV/mm);体系的剪切应力随温度升高而增大,且在高温区间具有较强的温度效应.

关键词: 聚线型反式喹吖啶酮 , 电流变流体 , 合成

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