孔亮
,
包永明
,
于志远
,
李伟
,
陈学国
,
胡良海
,
邹汉法
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.05.007
采用液相色谱-质谱联用方法分析了中药大黄经过SD大鼠肝匀浆体外代谢前后的指纹谱中色谱峰面积、保留值的差异.指出5种游离型蒽醌化合物在SD大鼠肝匀浆体外代谢体系中只有大黄酚发生代谢反应转化为芦荟大黄素.考察了体外代谢条件下,肝匀浆浓度与代谢时间对大黄酚转化及其代谢产物的影响.SD大鼠体外抗肿瘤试验表明,大黄代谢物对于人宫颈癌(HeLa)细胞的抑制活性略高于其提取物.通过比较芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的活性,并结合大黄酚的体外代谢反应的考察,解释了大黄代谢物对肿瘤细胞活性的抑制率的提高是由大黄酚的代谢产物芦荟大黄素浓度的增加引起的.
关键词:
高效液相色谱-质谱
,
大黄
,
色谱指纹谱
,
体外代谢
,
中药
,
SD大鼠
,
肝匀浆
胡良海
,
陶纬国
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00869
酪氨酸激酶在生物分子的信号转导中起着非常重要的作用,目前除抗体技术外尚无有效的化学方法能够实现酪氨酸磷酸化蛋白质或多肽的选择性富集.然而抗体通常成本较高,而且往往会有模体序列的选择性识别.因此,本文发展了一种基于化学反应的酪氨酸磷酸化肽段的选择性富集方法.该方法利用了β-消除反应只能发生在丝氨酸和苏氨酸磷酸化多肽的特性,通过反相选择实现对酪氨酸磷酸化肽段的选择性富集.以标准多肽对其反应效率和回收率进行了考察,20 min内丝氨酸磷酸化多肽的β-消除反应效率可达99％以上,而同时酪氨酸磷酸化肽段可保持70％的回收率.进一步以6种标准蛋白质混合物的酶解产物对其进行考察,经β-消除反应和亲和富集之后,只有酪氨酸磷酸化多肽可以被检测出来.该方法为蛋白质酪氨酸磷酸化的分析提供了一种新的手段.
关键词:
酪氨酸磷酸化
,
β-消除
,
磷酸化蛋白质组学
,
质谱
丛宇婷
,
胡良海
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08035
单克隆抗体药物是一类以免疫球蛋白G的结构为基础的大分子糖蛋白药物,为癌症、自身免疫疾病以及病毒感染等多种疾病的治疗提供了全新的途径.单抗药物的糖基化修饰类型及水平对其稳定性、清除率、免疫原性、抗体依赖细胞毒性及补体依赖细胞毒性等都有一定的影响.单抗药物的迅速发展及其在多种疾病治疗中日益凸显的重要性都对单抗药物的研发及用药安全等方面提出了更高的要求.因此,建立规范可靠的单抗药物糖基化修饰分析方法有着十分重要的意义.该综述将简要介绍单克隆抗体药物糖基化修饰及相关的定性、定量分析方法.
关键词:
单克隆抗体药物
,
糖基化修饰
,
质谱
,
蛋白质组学
,
综述
