张良滔
,
张立坚
,
张俊杰
,
刘春安
,
蔡春
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00342
建立了亲水作用色谱(HILIC)测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法.采用苯酚-氯仿提取组织中的DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,经N2吹干后,加乙腈-水(9:1,v/v)溶解,用Waters BEH HILIC柱进行分离,在277 nn波长下检测胞嘧啶(Cyt)及5-甲基胞嘧啶(5-mCyt)含量.结果表明,以乙腈-10 mmol/L甲酸铵溶液(94:6,v/v)为流动相,流速为0.5 mL/min,Cyt与5-mCyt分离较好,保留时间分别为2.6与3.1min.胞嘧啶的线性范围为1～900 μmol/L,相关系数为0.999 9;5-甲基胞嘧啶的线性范围为1～64 μmol/L,相关系数为0.999 8.胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为54 nmol/L(柱中为0.54 pmol),定量限为250 nmol/L(柱中为2.5 pmol);在5～900 μmol/L的添加水平下,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的平均加标回收率为94.7%～100.5%,相对标准偏差小于1.48%.用该方法检测了结肠癌组织中DNA甲基化水平,结果显示该癌组织中全基因组的DNA甲基化均值为4.0%.该方法快速、简单,稳定性好,灵敏度较高,能满足全基因组DNA甲基化的检测要求.
关键词:
亲水作用色谱
,
全基因组DNA甲基化
,
组织
,
结肠癌
陈丽宇
,
张立坚
,
张良滔
,
蔡春
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.12015
5-羟甲基胞嘧啶通过阻止脱氧核糖核酸(DNA)甲基化转移酶l(DMNT1)甲基化胞嘧啶来影响DNA甲基化的程度.本文建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定组织中全基因组5-羟甲基胞嘧啶水平的方法.采用苯酚-氯仿提取组织DNA.提取的DNA用88％甲酸在140℃下裂解,DNA裂解液加入同位素胞嘧啶作内标,经N2吹干后,加乙腈(9:1.v/v)溶解,用LC-MS/MS检测5-羟甲基胞嘧啶的含量,并计算全基因组中5-羟甲基胞嘧啶的水乎.结果表明,5-羟甲基胞嘧啶的线性范围为0.1～30 ng/mL,相关系数为0.996 9,检出限(信噪比为3计)和定量限(信噪比为10计)分别为0.057 ng/mL和0.090 ng/mL;日内相对标准偏差和日间相对标准偏差分别为5.13％和6.24％；加标回收率为90.24％～97.53％.用该方法检测了大鼠大脑组织DNA羟甲基化水平,平均结果为0.66％.该方法简便,重现性好,灵敏度较高,能满足全基因组5-羟甲基胞嘧啶定量检测的要求.
关键词:
液相色谱-串联质谱
,
5-羟甲基胞嘧啶
,
脱氧核糖核酸羟甲基化
,
组织
罗军
,
蔡春
,
吕春绪
,
曲文超
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2003.01.011
环状聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDMDAAC)对热和碱稳定,可以作为有效的相转移催化剂用于卤素交换氟化反应中,其性能优于十六烷基三甲基溴化铵、负载于高分子上的季GFDB2盐和吡啶GFDA7盐. 制得的水溶性高分子平均分子质量约为2×105 g/mol,用于对硝基氯苯的卤素交换氟化反应可得到92.5%的对硝基氟苯. 微波可以使反应速率提高到常规加热的3倍左右,其原因是微波对化学反应存在"非热效应".
关键词:
聚二烯丙基二甲基氯化铵
,
氟化
,
卤素交换反应
,
微波促进
,
硝基氟苯
易文斌
,
蔡春
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2005.11.006
制备了全氟辛基磺酸稀土金属盐(RE(OSO2C8F17)3,RE=Y,La～Lu),研究了该催化剂作用下氟两相Friedel-Crafts酰化反应.全氟己烷(C6F14)、全氟甲苯(C7F8)、全氟甲基环己烷(C7F14)、全氟辛烷(C8F18)、1-溴代全氟辛烷(C8F17Br)和全氟萘烷(C10F18,顺式与反式的混合物)可作为该反应的氟溶剂.考察了氟相和有机相的相比与酰化试剂种类对反应的影响.结果表明,反应具有强对位选择性酰化能力;Y(OSO2C8F17)3和C10F18分别是最好的催化剂和氟溶剂,以Y(OSO2C8F17)3为催化剂在C10F18中苯甲醚和乙酸酐的Friedel-Crafts酰化反应得率为56%,对位选择性超过99%;随着氟相和有机相相比的减小,产率升高,对位选择性降低;含有催化剂的氟相通过简单的相分离,就可回收利用,氟相重复使用5次,其催化活性减少不大.
关键词:
氟两相催化
,
全氟辛基磺酸稀土金属盐
,
全氟溶剂
,
Friedel-Crafts酰化
蒋建中
,
蔡春
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.10.016
研究了溴苯在O/W Triton X 10微乳(ME)体系和两相体系中Pd/C催化卤代烷烃Ullmann偶联反应. 结果表明,微乳体系中联苯收率高于两相体系;比较了在离子、非离子表面活性剂构成的不同微乳体系中的反应活性;研究了卤代芳烃在TX10 ME (O/W)中的甲酸钠、碱类型、Pd/C用量、温度等对反应的影响. 研究结果表明,当甲酸钠摩尔分数为10%,缚酸剂为碳酸钾和氢氧化钠的复配物;当Pd/C摩尔分数为2%,反应温度80 ℃及添加助表面活性剂四丁基氯化铵(TBAC)时,氯苯转化率为100%,联苯的选择性为98%. 添加TBAC等阳离子表面活性剂能促进反应. 因此微乳可作为Ullmann偶联反应的有效反应体系.
关键词:
偶联反应
,
微乳
,
卤代芳烃
易文斌
,
蔡春
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.11.024
制备了全氟辛基磺酸稀土金属盐RE(OPf)3(RE为Sc,Y,La～Lu),研究了该催化剂作用下芳香醛和二醇的缩合反应. 全氟己烷(CF3(CF2)4CF3)、全氟甲苯(C6F5CF3)、全氟甲基环己烷(C6F11CF3)、全氟辛烷(CF3(CF2)6CF3)、1-溴代全氟辛烷(CF3(CF2)6CF2Br)和全氟萘烷(C10F18,顺式与反式的混合物)可作为该反应的氟溶剂. 结果表明,Yb(OPf)3和C10F18分别是最好的催化剂和氟溶剂,以Yb(OPf)3为催化剂在C10F18中苯甲醛和乙二醇的缩合反应得率为83%. 含有催化剂的氟相通过简单的相分离,就可回收利用,氟相重复使用5次,其催化活性基本保持不变,缩合得率微降至81%.
关键词:
氟两相催化
,
全氟辛基磺酸稀土金属盐
,
全氟溶剂
,
缩醛
