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麦胚凝集素亲和色谱富集糖肽过程中的肽键裂解

卢庄 , 王京兰 , 贾伟 , 杨兵 , 蔡耘 , 邓玉林 , 张玉奎 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.01.003

蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一,与蛋白质结构和功能的关系密切.凝集素亲和色谱是蛋白质糖基化研究中很常用的工具,不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用.麦胚凝集素(WGA)由于其特异作用的糖型广泛存在而成为使用最多的凝集素之一.在本研究中,发现将WGA用于糖肽亲和富集会导致部分肽段...

关键词: 麦胚凝集素亲和色谱 , 糖肽 , 肽键 , 断裂 , 蛋白质组学

天冬氨酸作为非特异性吸附抑制剂在二氧化钛选择性富集磷酸肽中的应用

迟明 , 毕炜 , 卢庄 , 宋丽娜 , 贾伟 , 张养军 , 钱小红 , 蔡耘

色谱

二氧化钛富集法作为目前使用最为广泛的金属氧化物富集磷酸肽的方法,在富集过程中常常对富含天冬氨酸和谷氨酸的酸性非磷酸化肽段存在一定的非特异性吸附作用.这些肽段与磷酸化肽段一同被富集,降低了磷酸肽富集的选择性.传统方法中使用的非特异性吸附抑制剂常会对质谱的电喷雾离子源造成污染,因而限制了其在液相色谱-质...

关键词: 二氧化钛 , 富集 , 非特异性吸附抑制剂 , 天冬氨酸 , 磷酸肽 , 鼠肝

基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略

隋少卉 , 王京兰 , 卢庄 , 蔡耘 , 张养军 , 蔚文峰 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.02.012

为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用.实验结果表明优化后的体系能够在30 min内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对...

关键词: 磷酸化 , 位点 , 强阳离子交换色谱 , 富集 , 蛋白质组学

氧化石墨烯固定化凝集素的制备及在糖蛋白/糖肽富集中的应用

时照梅 , 范超 , 黄俊杰 , 白海红 , 秦伟捷 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.09037

生物体内蛋白质的糖基化修饰调控着细胞识别、细胞黏附和迁移以及免疫应答等多种生理过程,并与多种人类重大疾病的发生、发展密切相关.因此对蛋白质糖基化修饰的鉴定,不仅能够为生物学机理研究提供重要信息,对疾病诊断标志物和治疗靶标的发现也至关重要.然而在复杂生物体系中,大多数糖蛋白为低丰度蛋白质,其含量与现有...

关键词: 凝集素 , 氧化石墨烯 , 富集 , 糖蛋白 , 糖肽

蛋白质组学研究中的色谱分离技术

张养军 , 蔡耘 , 王京兰 , 李晓海 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.01.006

多维色谱-质谱技术正逐渐成为蛋白质组学研究的重要技术平台.对该技术及其应用的最新发展动态进行了综述,共引用文献59篇.

关键词: 多维色谱 , 质谱 , 蛋白质组学 , 综述

蛋白质组研究中的二维电泳分离技术

李蕾 , 应万涛 , 杨何义 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.01.007

对目前生命科学研究中的热点领域蛋白质组研究中应用的主要分离技术二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理、应用和最新进展进行了综述.同时,针对二维凝胶电泳的缺陷,介绍了目前正在发展的几种替代技术.

关键词: 蛋白质组 , 二维凝胶电泳 , 等电聚焦 , 胶上差示电泳

用反相液相色谱分离多肽时峰容量与色谱柱长度关系的研究

张养军 , 王京兰 , 李蕾 , 应万涛 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.01.006

在蛋白质组学研究中,多肽混合物的有效分离对蛋白质鉴定和蛋白质之间相互作用的研究起着决定性的影响.基于此,用反相液相色谱研究了在两个不同长度的色谱柱上分离多肽混合物时色谱柱长度与峰容量的关系,同时考察了梯度洗脱时间对峰容量和峰宽的影响.实验结果表明,色谱柱长度对峰容量有显著的影响,而延长梯度洗脱时间不...

关键词: 反相液相色谱 , 色谱柱长度 , 峰容量 , 多肽 , 蛋白质组学

复杂生物体系中蛋白质高效分离分析技术的新进展

孟庆芳 , 张养军 , 王京兰 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.006

继人类基因组计划完成之后,作为一种新的研究策略,蛋白质组学在生命科学研究中发挥着愈来愈重要的作用.由于生物体系的复杂性和多样性,使得分离效率高、灵敏度高、通量高和动态范围宽的分离分析技术平台的研究和应用已成为蛋白质组学研究的重点和热点之一.着重介绍了近年来应用日益广泛的多维色谱预分离、毛细管液相色谱...

关键词: 蛋白质组学 , 多维色谱 , 毛细管液相色谱-质谱 , 毛细管电泳-质谱 , 复杂生物体系

离线pH梯度-强阳离子交换色谱法分离肽段混合物

郑兆彬 , 应万涛 , 蔡耘 , 田中民 , 钱小红

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.003

复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提.Shotgun蛋白质组学研究通常采用二维液相色谱(强阳离子交换色谱-反相色谱)分离后接串联质谱检测的方法.但由于离子交换色谱体系中含有高浓度的盐,使得在线分析的难度较大;而在离线分析时,也常因需要对高盐组分进行脱盐处理而易引起样品损失.因此...

关键词: 离子交换色谱 , 缓冲体系 , pH梯度 , 肽段分离

基于共价色谱分离的含半胱氨酸肽段富集策略

米薇 , 王晶 , 应万涛 , 贾伟 , 蔡耘 , 钱小红

色谱

多维色谱分离、串联质谱分析技术已在蛋白质组研究中得到广泛应用.然而生物样品的蛋白质以及全酶切肽段具有高度的复杂性,这严重干扰了蛋白质高通量、规模化的分析.通过标签肽段富集进行样品预分离可以降低体系的复杂程度.本文建立了一种基于共价色谱技术选择性分离富集含半胱氨酸肽的方法,从而降低了样品体系的复杂程度...

关键词: 共价色谱 , 液相色谱-串联质谱 , 含半胱氨酸肽 , 富集 , 蛋白质组

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