岳丽君
,
魏玉霞
,
陈佳
,
林妮妮
,
王瑞
,
杨茜
,
张雅姣
,
谢剑炜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00325
运用高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)技术,建立了快速、简单、灵敏的SD大鼠肺中N7-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤(N7-HETEG)的检测方法.以N7-苯甲基鸟嘌呤为内标,用甲醇和水为流动相进行梯度洗脱,正离子模式检测,方法的检出限(信噪比(S/N)≥10)为300pg/mL,定量限(S/N≥20)为850pg/mL.在300 pg/mL～1.28μg/mL的质量浓度范围内,N7-HETEG浓度与N7-HETEG和内标的峰面积比呈良好的线性关系(线性相关系数为0.992 9).高、中、低3个添加水平的日内测定精密度(以相对标准偏差(RSD)计)和日间测定精密度均小于10%(n=7),回收率为100%～132%.对SD大鼠背部皮肤染芥子气,剂量分别为5.5、11、22和45mg/kg,染毒4 d后检测大鼠肺脏中N7-HETEG的含量.各个不同染毒剂量下,每克组织中分别检测到(0.56±0.16)、(0.67±0.12)、(1.36±0.68)和(5.14±0.92)ngN7-HETEG,N7-HETEG的含量随着染毒剂量的增大而增大,表明N7-HETEG可用作芥子气暴露的体内生物标志物.
关键词:
高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱
,
N7-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤
,
芥子气
,
皮肤染毒
,
肺
,
SD大鼠
杜蓉
,
陈保文
,
郭磊
,
李阳
,
谢剑炜
,
王国治
,
周宏兵
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.002
采用反相高效液相色谱法(HPLC)构建了49种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹图谱库,并对分枝杆菌进行分型鉴定.菌株经培养(对于慢生长分枝杆菌培养3周,快生长分枝杆菌培养1周)后,取两植菌勺的量,皂化1h后,于4℃下储存.通过酸化方法提取分枝菌酸.并用4-溴苯甲酰基溴衍生化,以HPLC分析分枝杆菌衍生物,并以其峰形的分布及峰的相对保留时间、相对峰高为指标对分枝杆菌进行分型鉴定.该法重现性良好,各峰保留时间的相对标准偏差为0.13%～1.07%.根据构建的49种<伯杰细菌鉴定手册>中所载入的分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱库,发现不同菌种的分枝菌酸的指纹图谱分别具有单簇峰、双簇峰、三簇峰(含多簇峰)的特征.依据相对保留时间和相对峰高的不同,对49种分枝杆菌中的41种进行了分型.结果表明,所建立的反相HPLC法可快速准确地对分枝杆菌进行分型鉴定.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
分枝菌酸
,
指纹图谱
,
分枝杆菌
,
分型
,
鉴定
,
结核分枝杆菌
郭磊
,
张朝阳
,
唐吉军
,
谢剑炜
色谱
在2008年世界反兴奋剂组织颁布的兴奋剂目录中,S2项肽类激素及相关品种均属于内源性生物大分子物质,如何区分所检测物质属于外界摄入还是机体分泌是此项检测的重点与难点.本文针对其中应用最为普遍、研究较为深入的促红细胞生成素(EPO)和人生长激素(hGH)的检测,从间接血液指标检测、直接检测途径等方面进行了分类评述,侧重于从理化分析方法、免疫分析方法角度阐述识别及区分重组蛋白与内源性蛋白的新途径.
关键词:
内源性物质
,
促红细胞生成素
,
人生长激素
,
兴奋剂检测方法
,
进展
孟庆威
,
郭磊
,
申睿
,
谢剑炜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00682
采用毛细管电泳法和蛋白质显色反应-二喹啉甲酸(BCA)法,结合微波辅助反应,在60 mmol/L 硼酸盐缓冲液(pH 9.5)中,实现了对蛋白质的快速毛细管电泳分析检测.同时以β-环糊精为包合添加剂,实现了BCA-Cu+复合物和游离BCA的分离,从而在波长200 nm处以测定特征生成的BCA-Cu+复合物来间接检测蛋白质,其峰强度比直接检测蛋白质自身吸收的峰强度提高了2个数量级.对于转铁蛋白、蓖麻毒素,其线性范围分别为2～200 mg/L 和2～100 mg/L,检出限分别为0.33和0.37 mg/L.将该方法成功地应用于第一届蓖麻毒素国际实验室间比对测试的部分样品,含量测定结果满意.
关键词:
毛细管电泳
,
二喹啉甲酸
,
亚铜离子
,
显色反应
,
β-环糊精
,
蛋白质
丘忠丽
,
林缨
,
熊志立
,
谢剑炜
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.03030
建立了大鼠血浆中内源性胍丁胺的同位素稀释-气相色谱-负化学电离质谱定量分析方法。大鼠血浆样品经蛋白沉淀并蒸干后，用六氟乙酰丙酮衍生化，采用 Florisil 固相萃取柱净化，以稳定同位素标记的 d8-胍丁胺为内标，在气相色谱-质谱仪上采用负化学电离方式电离，选择离子模式检测。胍丁胺标准溶液的检出限为0.0057 ng/mL。血浆中添加的胍丁胺在1.14~57.0 ng/mL范围内呈良好的线性关系（ r=0.997），方法回收率介于92.3％~109.8％之间，日内和日间精密度均小于15％。大鼠血浆中胍丁胺平均含量水平为（22±9）ng/mL，雌、雄大鼠血浆中的胍丁胺水平未见显著性差异（ p﹥0.05）。该方法特异性好、灵敏度高，为生物体内胍丁胺的生理功能研究提供了高灵敏的分析方法。
关键词:
气相色谱-负离子化学电离质谱
,
同位素稀释
,
内源性胍丁胺
,
血浆
,
大鼠
