赵京山
,
温进坤
,
韩梅
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.05.016
采用非涂层毛细管,以150 mmol/L硼酸盐缓冲液为电泳缓冲液,30 g/L聚乙二醇(PEG)20000为筛分介质,经对分离条件进行优化,成功地建立了用无胶筛分毛细管电泳检测微量蛋白质的方法.用所建立的方法测定骨桥蛋白,其批内、批间迁移时间的相对标准偏差均小于5%,回收率大于95%,被检测样品中骨桥蛋白的含量与其峰面积呈良好的线性关系(相关系数为0.996),最低检测限为0.079 g/L.考察了无血清饥饿培养对血管平滑肌细胞分泌骨桥蛋白的影响,结果表明无血清饥饿培养24 h骨桥蛋白的合成与分泌达到高峰,此后随时间延长含量随之降低,此结果与采用Western blot方法检测的结果一致.该方法具有进样量小(nL级)、检测速度快、可自动化等优点,是一种简便、快捷的检测微量蛋白质的好方法.
关键词:
毛细管电泳
,
聚乙二醇20000
,
无胶筛分
,
骨桥蛋白
,
血管平滑肌细胞
赵京山
,
温进坤
,
韩梅
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.05.020
采用熔融石英毛细管,以含有50 mmol/L 十二烷基硫酸钠的50 mmol/L硼酸盐缓冲液为电极缓冲液,以10 mmol/L硼酸盐缓冲液为上样缓冲液,经过对分离条件的优化,成功地建立了胶束电动毛细管色谱结合在线sweeping(推扫)富集技术检测中性脂溶性物质旋覆花内酯(acetylbritannilactone,ABL)的实验方法.所建方法的批内、批间测定值的相对标准偏差均小于5%,灵敏度为0.005 g/L,回收率大于92%;被检测样品的含量与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.997 5.用所建立的方法检测了旋覆花素中ABL的含量及其在体内的动态变化,结果表明胶束电动毛细管色谱结合在线sweeping样品富集技术可显著提高检测的灵敏度.该方法具有操作简单、进样量小(nL级)、检测速度快等特点,弥补了毛细管电泳在测定痕量组分方面的不足.
关键词:
胶束电动毛细管色谱
,
sweeping 在线富集技术
,
旋覆花内酯
,
旋覆花素
,
大鼠血浆
