王峰
,
梁力曼
,
顾正彪
,
崔正刚
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2008.11.003
以氯乙酰化聚苯乙烯树脂接枝四乙烯五胺、聚乙二醇链,用于固载α-淀粉酶,研究了酶的固定化条件和固定化对酶催化性能的影响. 结果表明,PS-TEPA树脂对α-淀粉酶的吸附率达83%酶活和72%蛋白;PS-g-PEG树脂的吸附率达60%酶活和56%蛋白. 使用戊二醛未能进一步提高酶的固定化量. 酶在固定化后对底物的亲和力增加,vmax/Km值从0.024(自由酶)上升至0.035(PS-TEPA)和0.038(PS-g-PEG),最适反应温度从40 ℃(自由酶)上升为50 ℃(PS-TEPA)和60 ℃(PS-g-PEG),最适反应pH值范围从7～8(自由酶)分别拓宽为7～10(PS-TEPA)和5～8(PS-g-PEG). PS-TEPA树脂固定化酶经去离子水洗脱43 h后的残余相对酶活是717型树脂固定化酶的1.28倍,是PS树脂固定化酶的1.69倍. 酶的失活半衰期在固定化后显著延长,70 ℃下的t1/2从1 h (自由酶)延长至4.5 h(PS-TEPA)和7.5 h(PS-g-PEG).
关键词:
聚苯乙烯四乙烯五胺树脂
,
聚苯乙烯-g-聚乙二醇树脂
,
α-淀粉酶
,
固定化
,
性能
王峰
,
梁力曼
,
顾正彪
,
崔正刚
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2010.01.019
采用荧光光谱和紫外吸收光谱法研究聚乙烯醇(PEG)和四乙烯五胺(TEPA)与淀粉酶相互作用. 结果表明,PEG会增强淀粉酶内源性荧光和酪氨酸残基所处微环境的疏水性;TEPA对淀粉酶内源性荧光的猝灭机制属于动态猝灭,但同时也存在静态猝灭特征,并使色氨酸残基所处微环境的极性增大;在所考察的范围内, PEG与淀粉酶的结合常数在40 ℃达到最高,TEPA对淀粉酶荧光的动态猝灭结合常数在30 ℃以上趋于最大,PEG、TEPA与淀粉酶之间的作用力属于疏水与静电作用相结合.
关键词:
聚乙烯醇
,
聚乙烯胺
,
淀粉酶
,
相互作用
