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固相萃取-高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术分析大鼠血浆中的氨基酸及其在电离辐射损伤动物模型中的应用

汤新星 , 顾源 , 蔡尚 , 徐美玲 , 王畅

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2012.01037

建立了基于高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-ESI MS/MS)与固相萃取(SPE)相结合的大鼠血浆中氨基酸的分析方法.以硅胶基质的强阳离子交换固相萃取柱(SCX-SPE)提取血浆中的氨基酸和降低基质效应,HPLC-ESI MS/MS进行测定.对SPE处理的样品pH值进行了优化,发现pH2.8时SCX-SPE提取氨基酸的回收率和重现性比较令人满意.除赖氨酸和鸟氨酸外,氨基酸的总体回收率在33.6%~107.7%之间;除精氨酸外,氨基酸标准曲线的线性相关系数r2>0.99; 25种氨基酸测定的日内精密度和日 间精密度较好,相对标准偏差(RSD)分别低于9.0%和19.1%.此外,将该分析方法用于电离辐射对大鼠血浆氨基酸代谢的影响研究.结果表明,辐射可导致血浆中氨基酸代谢紊乱,并且其紊乱程度与电离辐射损伤程度正相关.研究结果为筛选新的急性辐射损伤标记物研究提供了实验依据.

关键词: 固相萃取 , 高效液相色谱-电喷雾串联质谱 , 氨基酸 , 血浆 , 基质效应 , 电离辐射

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