骆雪芳
,
陈蓉
,
付静静
,
胡育筑
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.005
3',5'反向寡核苷酸是碱基组成和长度完全相同、碱基顺序相反的两个寡核苷酸序列.以三乙胺为离子对试剂,研究了缓冲液浓度(0.025～0.15 mol/L)、pH(5.0～6.8)、柱温(25～45 ℃)、流速(0.3～0.7 mL/min)以及不同初始洗脱强度和洗脱梯度条件下,6个3',5'反向寡核苷酸模拟样品保留和分离的变化特点.三组反向序列在缓冲液浓度为0.05 mol/L,pH 6.8和流速0.4 mL/min条件下获得最大分离,温度对分离的影响不大,而初始洗脱强度对反向序列的影响远大于洗脱梯度.实验结果表明3',5'反向寡核苷酸的分离和保留趋势不完全一致,色谱条件的优化应有利于实现样品在柱上的弱保留.研究结果还显示寡核苷酸序列中5'末端的保留强于3'末端.
关键词:
反相离子对色谱法
,
3',5'反向寡核苷酸
,
保留行为
