王希越
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高鹏
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许国旺
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.08008
建立了两性离子亲水作用色谱/质谱联用方法用于大肠杆菌胞内极性代谢物的分离分析。选取52个代表性极性物质对方法进行考察,发现此方法有较好的线性范围,且大部分物质最低检测限均在 ng/mL 数量级。平行制备6份样品进行分析,结果显示85%以上代谢物峰面积的 RSD值小于30%。6个内标物质在低、中、高3个浓度下的日内精密度( RSD)均小于20%,大部分物质的相对回收率都在可接受的范围内(70%~130%)。把此方法用于yfcC基因改造的3株大肠杆菌代谢组分析,发现一些小肽、氨基酸、核苷、有机酸、磷脂等物质在基因改造后发生明显变化。此研究结果表明,建立的两性离子亲水作用色谱/质谱方法检测到的物质化学性质分布广,跨越了极性磷脂到小肽的各个范围,且具有良好的重复性、稳定性和适用性。
关键词:
两性亲水作用色谱/质谱
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极性物质
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大肠杆菌
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代谢组分析