张琦弦
,
张文华
,
廖学品
,
石碧
功能材料
以戊二醛交联胶原纤维为吸附剂,通过柱层析研究其对芹菜素、槲皮素和杨梅素组成的三元黄酮类混合物中芹菜素的分离纯化特性。结果表明胶原纤维吸附剂对3种黄酮化合物表现出一定的吸附差异,对芹菜素的吸附作用最小;用100%～70%乙醇水溶液分步淋洗,能够从混合物中分离得到芹菜素,其纯度为98.03%,回收率为100%;用40%～60%乙醇水溶液分步淋洗,能够分离得到芹菜素和槲皮素,产物纯度分别为99.16%和99.47%,回收率分别为100%和91.22%;适当增大吸附柱的柱高,有助于提高芹菜素的纯度;在5次重复分离实验中,胶原纤维吸附剂的分离性能无明显降低,具有较好的重复使用性。因此,胶原纤维吸附剂可用于黄酮类混合物中芹菜素的分离纯化。
关键词:
胶原纤维
,
吸附剂
,
芹菜素
,
层析
,
分离纯化
白鹏利
,
韩坤
,
程文播
材料导报
综述了基于磁性微球的核酸自动提取技术的发展现状,介绍了磁性微球的制备、磁性微球在核酸分离中的应用以及基于磁性微球的分离纯化系统,最后展望了基于磁性微球的核酸自动提取技术的发展前景.
关键词:
磁性微球
,
高分子微球
,
核酸
,
分离纯化
郅文波
,
邓秋云
,
宋江楠
,
顾铭
,
欧阳藩
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.003
利用多分离柱高速逆流色谱仪,研究了聚乙二醇1000(PEG1000)-磷酸盐双水相体系的固定相保留率及该体系对蛋白质混合物和鸡蛋清样品的分离.以14.0%PEG1000-16.0%磷酸盐体系的上相为固定相,在流速0.6mL/min和转速900 r/min的条件下,固定相的保留率达到33.3%.在pH 9.2的PEG1000-磷酸盐双水相体系中,细胞色素C、溶菌酶和血红蛋白的分配系数差异最大,采用该pH值的14.0%PEG1000-16.0%磷酸钾盐双水相体系,在流速1.0 mL/min和转速850 r/min的条件下,成功地分离了这3种蛋白质的混合物.鸡蛋清中的主要蛋白质成分--卵转铁蛋白、卵白蛋白和溶菌酶在pH 9.2的15.0%PEG1000-17.0%磷酸钾盐体系中也具有最大的分配系数差异.采用该体系,在流速1.0 mL/min和转速850 r/min的条件下,成功地分离了鸡蛋清样品,得到的卵白蛋白、溶菌酶和卵转铁蛋白的电泳纯度分别为100%,100%和60%,收率均大于90%.
关键词:
高速逆流色谱
,
双水相体系
,
蛋白质
,
分离纯化
肖玉秀
,
梅洁
,
何秀峰
,
程伟
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.01.008
采用溶剂提取和柱色谱法分离纯化市售大豆粉末磷脂(卵磷脂含量14.05%),得到高纯度的卵磷脂产品(纯度92.80%).重点建立了磷脂的胶束电动毛细管色谱(MECC)分离分析方法.以分离度和峰面积为优化指标,对表面活性剂及其浓度、电泳缓冲液pH、有机改性剂及其含量、缓冲液浓度、温度等条件进行优化,确定了最优化电泳条件:电泳缓冲液为35 mmol/L脱氧胆酸钠-1 mmol/L硼砂缓冲液/正丙醇(体积比为57:43)(pH 8.30),柱温44℃,操作电压25 kV,检测波长200 nm;内加法定性磷脂组分;外标法定量卵磷脂.结果表明,MECC法能有效分离5种磷脂组分;0.1～1g/L的质量浓度范围内卵磷脂的线性关系良好(r=0.999 0),平均回收率为98.0%,日内、日间精密度分别为1.36%和3.27%,定性结果与薄层色谱法、红外光谱法的定性结果相符.
关键词:
高效毛细管电泳
,
胶束电动毛细管色谱
,
分离纯化
,
磷脂
,
卵磷脂
边六交
,
杨晓燕
,
刘莉
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.006
建立了一种用CM Sepharose CL-6B阳离子交换、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephadex G-75凝胶排阻三步柱色谱从江浙蝮蛇蛇毒中分离纯化类凝血酶的方法.在实验室小柱分离方案的基础上,对该纯化工艺进行了放大.当上样量达实验室小柱的25倍时,所得类凝血酶的质量指标与实验室小柱基本一致.采用该法所得的蝮蛇类凝血酶经Shim-pack Diol-300高效凝胶排阻柱测得其相对分子质量约为33 500,用Shim-pack VP-ODS反相色谱柱检测其纯度约为96% .从江浙粗蛇毒中提取类凝血酶时,类凝血酶的总质量收率约为0.3% ,总活性收率约为64% ,比活可达2 000 U/mg.
关键词:
三步柱色谱
,
类凝血酶
,
蛇毒
,
江浙蝮蛇
,
分离纯化
潘见
,
袁传勋
,
戴郁青
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.05.013
建立了采用配位色谱柱从葛根素浸膏中分离纯化葛根素的方法.以铜离子为中心离子,制备了中心离子含量为7%的配位色谱柱.样品上样于配位色谱柱后,以氯仿-甲醇(体积比为10∶1)混合溶剂洗脱,得到了较纯的葛根素,较之用传统的硅胶色谱柱纯化,纯度提高了11%,回收率提高了12%,且柱容量提高了两倍.配位色谱改变了葛根素在传统硅胶柱上的洗脱顺序,对目标物质的分辨率比传统硅胶色谱柱高.
关键词:
配位色谱
,
铜离子
,
分离纯化
,
葛根素
,
葛根素浸膏
刘兴宝
,
栾宏伟
,
葛广波
,
侯琨
,
杜逊甫
,
杨凌
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.10021
基于工业色谱法分离制备抗癌药物紫杉醇的半合成前体10-去乙酰紫杉醇(10-DAP).7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇(10-DAXP)在我国特有红豆杉品系(中华红豆杉)枝叶中含量丰富,以其为原料可制备紫杉醇最理想的半合成前体——10-DAP.本研究以部分纯化后的7-木糖基-10-去乙酰紫杉烷为原料,通过β-木糖苷酶水解该粗提物中的主要成分10-DAXP及其两个微量类似物7-木糖基-10-去乙酰三尖杉宁碱(10-DAXC)和7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇C(10-DAXPC),脱去其C-7位上的木糖基,水解产物采用大孔吸附树脂吸附,正相快速柱分离和反相制备色谱分离,可获得高纯度的目标物10-DAP,产物纯度为96％,整个工艺的收率大于75％.该方法适合以10-DAXP为原料大规模制备紫杉醇的半合成前体化合物10-DAP,为工业化生产紫杉醇开辟了一条新途径.
关键词:
制备色谱
,
7-木糖基-10-去乙酰紫杉醇
,
10-去乙酰紫杉醇
,
紫杉醇
,
7-木糖基-10-去乙酰紫杉烷
,
分离纯化
康丽梅
,
张焱
,
罗坚
,
李由
,
周月芳
,
余蓉
,
苏志国
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.01036
建立了一条从人血浆中分离高活性凝血因子Ⅷ(FⅧ)的纯化工艺.基于FⅧ和介质孔径的尺度比及其对蛋白质活性影响的分析,设计了以超大孔离子交换制备色谱为核心步骤的新型分离纯化工艺.分别进行超大孔离子交换色谱与传统离子交换色谱的条件优化,并对优化工艺所得产品进行了活性检测(底物显色法)和纯度检测(高效凝胶过滤和凝胶电泳).结果表明,超大孔介质结构不但可以有效地保护蛋白质大分子结构,而且能够大幅度地提高制备色谱的传质速率,从而得到具有高凝血活性的FⅧ产品.FⅧ在超大孔制备色谱过程中的回收率(85％)比传统离子交换制备色谱高4～5倍,产品比活高达154 IU/mg.此外,还研究了超大孔介质的再生程序,采用5个柱体积的1mol/L NaOH低流速清洗色谱柱,保证了色谱工艺的稳定性.本纯化工艺步骤简单,重现性好,易于放大生产.
关键词:
超大孔离子交换制备色谱
,
凝血因子Ⅷ
,
血浆蛋白
,
分离纯化
翁叶靖
,
随志刚
,
张丽华
,
张玉奎
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.08036
外泌体是一种由细胞分泌的膜性囊泡小体,直径通常为30～ 100 nm,密度为1.10～ 1.18 kg/L.外泌体广泛存在于各种体液中,可携带脂类、蛋白质、信使RNAs(mRNAs)、microRNAs(miRNAs)、非编码RNAs(ncRNAs)等多种重要的生物功能分子.许多证据表明,外泌体形成了一种特殊的细胞间信息传递系统,不仅影响细胞的生理状态,而且与多种疾病的发生与发展密切相关.该文简要综述了近年来在外泌体的分离和纯化方面取得的研究进展,并对蛋白质组学技术在外泌体分析中的应用进行了概述.此外,还对外泌体蛋白质组学研究的发展前景进行了展望.
关键词:
外泌体
,
分离纯化
,
蛋白质组学
,
定量分析
,
综述
,
综述
