田慧芳
,
徐庆春
,
丁慧荣
,
田志华
,
张宏
,
朱华
,
王昕
,
沈靖
分析化学
doi:10.11895/j.issn.0253-3820.150615
建立了双功能试剂2-[(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)与标准肽段反应的新方法,测定了反应产物与镧系金属Eu(Ⅲ)的螯合效率,探索了其作为靶向探针和蛋白定量标记试剂性能。考察了不同缓冲体系的浓度及pH值、p-SCN-Bn-DOTA量与肽段相对量、反应体系中有机相与水相比例,反应温度与反应时间对偶联效率的影响。实验结果显示:p-SCN-Bn-DOTA量为肽段的32倍,缓冲体系为0.2 mol/L TEAB (pH 8.5),60℃反应60 min,有机相与水相之比为4.4:1(V/V)时标记效率高;在HCl/NaAc缓冲体系(pH 4.0)中60℃反应60 min,金属离子鳌合反应效率高达94%。本研究建立了一种新的基于双功能试剂p-SCN-Bn-DOTA的标记方法,并成功用于RGD肽等的标记。
关键词:
双功能试剂
,
标记
,
多肽
,
蛋白定量
,
质谱
