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虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ去折叠过程的色谱分析

张鹏飞 , 肖顺勇 , 梁宋平

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.04.025

将纯化的天然虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ经盐酸胍变性30 min后,在pH 3.0、反应温度为37 ℃的条件下与三羧甲基磷酸(TCEP)反应12 min,用反相高效液相色谱分离得到其全部去折叠中间体,通过基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行鉴定,并利用烷基化反应对这些去折叠中间体予以进一步确证. 根据其保留时间,分析虎纹毒素-Ⅴ各去折叠中间体的色谱行为,初步探讨了多肽或蛋白质构象异构体反相色谱行为的多样性.

关键词: 反相高效液相色谱 , 基体辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 , 三羧甲基磷酸 , 去折叠 , 虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ

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