杨春霞
,
周晶
,
龚波林
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.02.012
以自制的5.0 μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球为基质,对其表面进行化学改性,合成弱阳离子交换色谱填料(WCX).详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、表面亲水性能、稳定性和重现性以及流速对蛋白保留的影响.实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、重现性及稳定性良好;在流速为3 mL/min 时,采用线性梯度洗脱,6 min内可分离4种标准碱性蛋白质,以溶菌酶测定的该填料的动力学吸附容量为29.86 mg/g.将其用于鱼精蛋白的分离纯化,经反相高效液相色谱测定纯化后鱼精蛋白的纯度为99.2% ;与商品Shodex IEC SP-825强阳离子交换色谱柱比较,纯化结果几乎一样.
关键词:
单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球
,
弱阳离子交换填料
,
蛋白质纯化
,
鱼精蛋白
