刘康栋
,
邹志清
,
冉瑞
,
庄贵生
,
金庆辉
,
赵建龙
,
杨梦苏
功能材料与器件学报
doi:10.3969/j.issn.1007-4252.2007.01.010
应用分子自组装技术,在SiO2表面衍生活泼醛基,在SiO2表面有125 nm的衍生物,衍生的醛基和氨基发生共价反应而将人免疫球蛋白G固定在二氧化硅表面,抗原抗体反应显示固定的抗体有活性.应用微加工技术加工含交叉排列的椭圆形微柱阵列的微流控芯片,有效增加内表面积和流体接触机会,用同样修饰方法修饰微流控芯片内表面并固定人免疫球蛋白G,流经管道的相应抗抗体和其发生反应而被吸附在管道表面,实现对该抗抗体的亲和富集,富集后荧光密度增加15倍.表面修饰技术能实现蛋白质在二氧化硅表面的固定并保持其生物活性,结合微流控芯片能实现对相应蛋白质的微量富集.
关键词:
表面修饰
,
抗体
,
微流控芯片
,
富集
郭明明
,
王俊玲
,
吴彦卓
,
徐明波
,
高向东
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.08018
为了获得一种优良的抗体纯化介质,制备了重组金黄色葡萄球菌蛋白A( rProtein A)亲和填料,并考察了所制备的亲和填料的纯化性能.利用自行构建的rProtein A工程菌,经诱导表达、纯化获得rProtein A纯品,将其偶联到经环氧氯丙烷活化的Sepharose 4 Fast Flow凝胶上,得到rProtein A亲和填料,并使用兔抗尿酸氧化酶抗体对该填料的性能进行验证.结果显示,在自制的rProtein A亲和填料上rProteinA浓度为1.5×10-4 mol/L.采用Scatchard模型分析,得到其解离常数和最大表观吸附量分别为2.28×10-7 mol/L和20.697 g/L,说明制得的rProtein A亲和填料对抗体有很好的结合能力.将该填料于0.1 mol/L NaOH溶液中浸泡1h,其色谱性能未见变化.将该填料用于纯化兔抗体,湿胶结合抗体量可达19 mg/mL；一步柱色谱即可得到电泳纯度的抗体样品,回收率高于96％.本研究为rProteinA亲和填料的国产化奠定了基础.
关键词:
重组金黄色葡萄球菌蛋白A
,
亲和填料
,
制备
,
纯化
,
抗体
张鹏
,
孙长龙
,
张人
,
高明霞
,
张祥民
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01022
开发了一种新颖便捷的循环肿瘤细胞(CTC)捕获芯片用于癌细胞的分离和检测.CTC芯片以硝酸纤维素膜为基底制备,利用其对蛋白质的超强吸附能力来结合抗体,简便高效,便于将来大规模的推广应用.以非小肺癌细胞NCI-H1650为目标靶细胞,证明了CTC芯片对癌细胞具有很高的捕获效能.向l mL正常人血液中加入500个癌细胞模拟病人血样的分析中成功检测到了182个癌细胞,预示了CTC芯片将来在临床应用上的巨大潜力.
关键词:
硝酸纤维素膜
,
芯片
,
循环肿瘤细胞
,
抗体
张明翠
,
庄惠生
,
郎庆
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2007.05.010
邻苯二甲酸二丁酯(DBP)半抗原衍生物通过偶氮键与载体蛋白BSA偶合后作为免疫原,免疫新西兰大白兔,得到合格的DBP抗血清,双向琼脂扩散方法测定血清效价为1:32～1:64,间接荧光免疫法检测效价为1:6 400～1:12 800.通过兔颈部采血、抗血清纯化,得到的抗邻苯二甲酸二丁酯多克隆抗体IgG冻干后,分装在-20 ℃低温保存.建立了间接荧光免疫法检测纯化抗体的方法.间接竞争荧光免疫法考察交叉反应试验结果显示,纯化抗邻苯二甲酸二丁酯抗体与邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丙酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二戊酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯等邻苯二甲酸酯类环境激素的交叉反应均小于10%.制备的抗体可应用于环境激素DBP的荧光免疫分析.
关键词:
邻苯二甲酸二丁酯
,
抗体
,
制备
,
荧光免疫分析
