周锦兰
,
胡健华
,
裘爱泳
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.04.019
用柱色谱方法从甘蓝型油菜籽中分离提纯了1-硫[(1Z)-3-羟基-1-[(磺酸基)亚氨基]-4-戊烯基]-1-硫代-β-D-葡萄糖钾盐(progoitrin).用甲醇溶液提取菜籽中的硫甙,得到粗提物;粗提物经酸性氧化铝色谱柱与反相C18硅胶柱进一步分离提纯,得到纯品.对纯品进行紫外光谱、红外光谱、核磁共振氢谱、质谱和元素分析,测得的数据与文献值相符.用高效液相色谱测得硫甙提取物的纯度为99% .该方法操作简便,得到的硫甙样品纯度高,是一种有价值的硫甙提取方法,具有良好的应用前景.
关键词:
柱色谱
,
硫甙
,
分离
,
提纯
,
油菜籽
王亮
,
刘翠平
,
贾丹
,
邹伟
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.014
采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇作为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰胆碱(PC),并采用GF254硅胶板薄层色谱法以氯仿-甲醇-水(65∶25∶4,体积比)为展开剂测定了PC的纯度.结果表明以95%乙醇洗脱氧化铝色谱柱中的磷脂时,PC可完全与磷脂酰乙醇胺分离,其纯度和得率均高于80% .采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了不同浓度的PC对大鼠肝癌CBRH-7919 细胞增殖的影响,并与人白血病K562细胞做比较,发现肝源性PC对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且存在时间-剂量依赖关系.
关键词:
柱色谱
,
磷脂酰胆碱
,
猪肝
,
生物活性
,
肝癌细胞
刘振宇
,
吴祖建
,
林奇英
,
谢联辉
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.015
通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-75凝胶过滤柱分离纯化得到了孔石莼(Ulva pertusa)的质体蓝素.其步骤为:将孔石莼样品以0.02 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.2)进行匀浆,然后离心去除沉淀,将上清液用硫酸铵分级盐析获得饱和度为40% ～80%的盐析蛋白;通过DEAE-Sepharose 柱色谱,在含有0～1.0 mol/L NaCl 的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液线性梯度洗脱下,盐析蛋白有3个主要的洗脱峰,然后在Sephadex G-75凝胶过滤色谱柱中进一步纯化.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,该蛋白质被纯化为单一条带.根据蛋白质电泳迁移率,纯化蛋白质的相对分子质量约为10000.该蛋白质不含糖.纯化的蛋白质经电转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜后,以Edman降解法进行N-端氨基酸序列测定,前20个氨基酸残基序列为AAIVKLGPDDGSLAFVPSKI.通过对相关蛋白质数据库的检索,发现该序列与3种已报道的海藻的质体蓝素具有较高的序列同源性,其同源性分别为85% ,85% 和90% .据此,认为孔石莼的质体蓝素已获得纯化,其N-端20个氨基酸残基与已报道的海藻质体蓝素的氨基酸残基有较大的同源性,也存在着一定的变异.
关键词:
柱色谱
,
质体蓝素
,
孔石莼
,
纯化
,
N-端氨基酸序列
樊改仙
,
徐元源
,
李莹
,
李英
,
相宏伟
,
李永旺
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.022
在柱色谱柱中填充100～200目的硅胶,以二甲亚砜为洗脱剂,将F-T合成油产物分离为烃类及有机含氧化合物两部分.采用气相色谱-质谱(GC-MS)对有机含氧化合物部分进行了分析,共鉴定出有机含氧化合物139种,并对其出峰规律进行了总结.
关键词:
柱色谱
,
气相色谱-质谱
,
含氧化合物
,
F-T合成油
徐立华
,
王世祥
,
郑晓晖
,
边六交
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00374
β2-肾上腺素能受体是细胞表面受体的一种,它能通过偶联异源三聚体G蛋白将信号转导引入到细胞内部.本实验在成功克隆、表达β2-肾上腺素能受体的基础上,建立了一种两步柱色谱分离纯化目的蛋白质的方法.首先利用Ni2+螯合的高分辨纯化的预带电荷介质Sepharose High Performance与含有六聚组氨酸标签的蛋白质特异结合的性质,对目的蛋白质进行初步分离,接着运用快流速Q琼脂糖凝胶(Quaternary Sepharose Fast Flow)对其进行进一步的分离纯化.采用该方法得到的β2-肾上腺素能受体蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻色谱检测其纯度约为95%.结果表明该方法可以对重组猪β2-肾上腺素能受体进行有效的分离纯化.
关键词:
柱色谱
,
分离
,
纯化
,
β2-肾上腺素能受体
刘洋
,
钟华
,
刘智峰
,
蒋勇兵
,
谈菲
,
曾光明
,
赖明勇
,
何益斌
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.10026
生物表面活性剂鼠李糖脂是微生物在一定条件下产生的次级代谢产物，其分子具有极性亲水基团和非极性亲油基团结构，通常表现出很高的表面活性和界面优先分配能力。可靠的分离提纯方法和成分鉴定手段是鼠李糖脂生产工艺成功的重要保证。实验通过好氧发酵培养铜绿假单胞菌CCTCCAB93066、酸沉降分离得到鼠李糖脂后，利用柱色谱提纯技术得到纯化的鼠李糖脂的单糖脂和二糖脂，最后采用高效液相色谱-质谱联用法进行成分鉴定。结果显示这两种鼠李糖脂均含有3种主要成分，其中单糖脂的主要成分为RhaC10C10、RhaC10C12-H2、RhaC10C12，二糖脂的主要成分为Rha2C10C10、Rha2C10C12-H2、Rha2C10C12。该研究结果表明，铜绿假单胞菌CCTCCAB93066是一种良好的鼠李糖脂产生菌；酸沉降-柱色谱技术可以用于鼠李糖脂的深度提纯，且有较好的效果；而高效液相色谱-质谱联用技术对鼠李糖脂成分鉴定具有灵敏度高和准确性好等优点，是一种较为可靠的检测方法。
关键词:
酸沉降
,
柱色谱
,
高效液相色谱-质谱联用
,
鼠李糖脂
,
铜绿假单胞菌
,
生物表面活性剂
夏薇
,
陈新志
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2004.01.016
采用直接柱色谱的方法,用石油醚单一溶剂作为洗脱液,从霉烟或碎烟末浸膏中提取了β-胡萝卜素纯品.通过1H-NMR和13C-NMR谱图鉴定了β-胡萝卜素的结构.用高效液相色谱法(HPLC)测得β-胡萝卜素纯品的纯度为98%,测定方法准确性高、重现性好,β-胡萝卜素纯品的红外光谱图和熔点均与文献值相符.利用该方法提取β-胡萝卜素纯品,不仅收率达到80%,纯度好,而且单一溶剂作为洗脱液很容易回收再利用,因此说该方法是一种有价值的生产天然β-胡萝卜素的方法,具有良好的工业应用前景.
关键词:
柱色谱
,
β-胡萝卜素
,
烟叶
