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反相高效液相色谱法测定大鼠肝组织中DNA的碱基含量

王超云 , 胡凤祖 , 师治贤

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.04.014

利用反相高效液相色谱法,采用Supelcosil LC-18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),以甲醇-0.05 mol/L KH2PO4缓冲液(体积比为20∶80)为流动相,流速0.8 mL/min,在254 nm波长处检测,对生活在高原(海拔2.3 km)的习服大鼠肝组织中脱氧核糖核酸(DNA)的碱基含量进行了检测,发现各碱基在DNA中所占的比例是相对稳定的:腺嘌呤(A)28.8%、鸟嘌呤(G)23.3%、胞嘧啶(C)17.4%、胸腺嘧啶(T)25.3%,并利用内标法对DNA甲基化水平进行了测定.

关键词: 反相高效液相色谱法 , 脱氧核糖核酸 , 碱基 , 甲基化水平 , 肝组织 , 大鼠

低共熔溶剂新型亲水作用色谱流动相改性剂

谭婷 , 乔鑫 , 万益群 , 邱洪灯

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.05002

低共熔溶剂被用作亲水作用色谱流动相的新型改性剂。选用硅胶柱(150 mm×4?6 mm,3μm),以乙腈与低共熔溶剂(氯化胆碱?乙二醇(摩尔比为1∶3))的混合溶液为流动相,考察了6个碱基与核苷的色谱分离效果,并讨论了低共熔溶剂在流动相中的比例及温度条件对分离的影响。结果表明,与传统的水相流动相条件相比,在加入低共熔溶剂改性后的流动相条件下,碱基与核苷分离效果得到明显的改善,尤其是胞嘧啶与胞苷能达到完全分离;同时,随着低共熔溶剂在乙腈中浓度的增加,6个碱基与核苷在色谱柱上的保留均有不同程度的减小,其中胞苷的保留减小最为显著;随着柱温的升高,碱基与核苷的保留同样有所减小。本文验证了低共熔溶剂作为亲水作用色谱流动相改性剂的可行性,可在一定程度上解决传统亲水作用色谱分离的困难。

关键词: 亲水作用色谱 , 低共熔溶剂 , 改性剂 , 流动相 , 碱基 , 核苷

碱基在十二胺-N,N-二亚甲基膦酸改性氧化锆固定相上色谱行为的研究

姚礼峰 , 冯钰锜 , 达世禄

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.014

研究了碱基在十二胺-N,N-二亚甲基膦酸(DDPA)改性氧化锆固定相(DPZ)上的色谱保留行为,考察了流动相中甲醇含量、流动相pH值、缓冲溶液中离子类型和离子强度对碱基保留的影响,对DDPA在氧化锆表面的吸附方式进行了研究.研究结果表明,DDPA仅以一个膦酸基与氧化锆结合,因而DPZ固定相表面上除了有长链的疏水烷基外,还有酸性的膦酸基和碱性的氨基.碱基分子中也存在氨基和酰胺基等极性基团,因此碱基在DPZ固定相上除了有疏水作用外,还具有电荷排斥作用、离子交换作用等多种保留机理.由于多种保留机理的存在,使得碱基在DPZ固定相上具有较好的分离选择性,在酸性条件下对碱基混合样品的分离取得了满意的结果.

关键词: 氧化锆 , 十二胺-N,N-二亚甲基膦酸 , 碱基

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