王琴梅
,
张涤华
,
张静夏
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2009.06.004
采用异双官能团光偶联剂-(全氟代叠氮基苯甲酰胺基)乙基-1,3-二硫代丙酸磺基丁二酸亚胺酯(SFAD),将碳酸酐酶(CA)接枝在无活性官能团的聚甲基戊烯(PMP)膜式氧合器表面,以对硝基苯酚乙酸酯(p-NPA)为底物,采用紫外分光光度计测定了接枝CA的活性、浓度、重复利用性、储存稳定性. 结果表明,采用SFAD能将酶成功地接枝在无活性官能团的聚合物表面;共价接枝的CACI(Covalently immobilized CA)具有催化活性,其在PMP表面的接枝量随SFAD浓度的增加而增加,最高达到0.414 U/m2,为单分子层理论接枝量的87.4%. CACI比物理吸附的CAPA(Physically adsorbed CA)具有更好的重复利用性. 1次洗涤后,PMP表面CAPA活性为0,而9次洗涤后CACI仍保留约59%的活性. 37 ℃下CACI比CA溶液表现出更好的储存稳定性:16 d内,CA溶液失去约90%的活性,而CACI只失去约60%的活性.
关键词:
聚甲基戊烯
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光偶联剂
,
碳酸酐酶
,
对硝基苯酚乙酸酯
高伟芳
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肖翔
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张朝晖
材料导报
以硅藻土为载体,通过共价结合法固定化碳酸酐酶.对制备固定化晦过程中的pH值、加酶量、反应温度、反应时间几个重要的影响因素进行了研究和优化,并对固定化酶和游离酶的酶学性质进行了比较.结果表明,固定化酶的最适反应温度为30℃,比游离酶高了5℃;最适反应pH值为6.0,比游离酶低了2个pH值单位.该固定化酶的热稳定性、酸碱稳定性和操作稳定性均高于游离酶.
关键词:
碳酸酐酶
,
固定化
,
硅藻土