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稳定同位素稀释技术在人体肝脏维生素A储备量检测中的应用

王丽 , 邵莹莹 , 李磊 , 汪之顼

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.12019

建立了稳定同位素稀释技术结合高效液相色谱-气相色谱/负化学电离源质谱法( HPLC-GC/NCI/MS)测定人体肝脏维生素 A(VA)储备量的方法。志愿者在口服氘标记的视黄醇醋酸酯(2H8-RAC)后,经21天的稳定期,采集血样,分离血清。血清经正己烷提取,高效液相色谱分离纯化后,氮气吹干供进一步衍生化,衍生化产物用 GC/NCI/MS检测,获得标记与未标记 VA 的丰度比,最后利用 Furr-Olson 公式计算 VA 肝脏储备量。在优化的条件下,血清样本中 VA的回收率大于85%,精密度( RSD,n=6)小于10%,定量限为26.4μg/L,基本满足口服1 mg 2 H8-RAC后标记与未标记 VA的检测要求。相比国内现行的人体 VA评价方法,该方法能更客观地反映人体 VA营养水平。该项测定技术与 VA干预实验相结合,可获得某一人群维持体内 VA 稳定储备水平的膳食摄入量水平。同时,稳定同位素示踪技术的运用对促进经口摄入的 VA源在体内生物转化效率的研究也起着重要作用。

关键词: 稳定同位素稀释 , 高效液相色谱 , 气相色谱/负化学电离源/质谱 , 维生素A , 肝脏储备量

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