吴文帅
,
丁雄
,
牟颖
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10005
精准医疗急需更加精确、灵敏、方便快捷的核酸定量方法.设计开发了一种结合双荧光等温扩增的高密度皮升级核酸定量微流控芯片.芯片采用多层软光刻技术制成,有3个反应通道,每通道有 40 000 个反应小室,共 120 576 个皮升级反应小室,反应小室的密度达 7 000/cm2.芯片利用负压驱动样品精确分配,热凝固油相封闭小室,无需阀门及其他仪器辅助.芯片中嵌入的氟硅烷纳米涂层能有效地阻止反应过程中水蒸气的散失.以乙肝病毒(hepatitis B virus, HBV)质粒作为模板,进行等温多底物自配引发扩增(isothermal multiple self-matching-initiated amplification, IMSA),测试芯片定量性能.芯片检测模板的动态范围达6个数量级,可检测的最大模板量为36 μL中1.13×106拷贝数核酸.该装置具有定量精确、灵敏、快捷、操作简单等优势,可用于精准检测.
关键词:
微流控芯片
,
负压驱动
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等温多底物自配引发扩增
,
高密度
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精确定量
