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聚合酶链式反应(PCR)量热学的实验研究

冉姝 , 华泽钊 , 王景宇

工程热物理学报

聚合酶链式反应(PCR)是一种人工体外扩增特异DNA片段的技术.CR反应的三个过程都是热过程.本文首次利用差式扫描量热仪(DSC)模拟PCR反应.试验表明PCR反应变性过程是吸热过程;退火和延伸过程是放热过程;并且获得了这些过程的量热学数据.这些研究结果对分析和判断PCR临床检验的假阴性是有用的.

关键词: 量热学 , 聚合酶链式反应 , 差式扫描量热术 , 假阴性

X射线辐照引起的线粒体D310片段突变的快速检测

张昕 , 周鑫 , 张红

原子核物理评论

采用4GyX射线辐照人乳腺癌细胞MCF-7,分别在照射后0,2,4,8,16,24,48,72和144h时间点收集细胞,提取DNA并以聚合酶链式反应进行扩增,再以BsaXI限制性内切酶对扩增产物进行消化,消化产物以琼脂糖凝胶电泳进行分离.结果表明,4GyX射线辐照可引起D310片段突变,且该突变在经辐照之后144h检测水平明显超过野生型.

关键词: X射线辐照 , 线粒体DNA损伤 , D310片段突变 , 聚合酶链式反应

氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率、灵敏度和特异性的影响

蒋城 , 杨中柱 , 赵美莲 , 宋瑱

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2017.04.2016072203

以人类基因组DNA和志贺氏菌粗制裂解菌液为模板,扩增115 bp的Alu基因片段和402 bp的ipaH基因片段.通过设置氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)和模板的浓度为变量,分别研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增效率和灵敏度的影响;运用多轮PCR扩增方法研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增特异性的影响.结果显示,氧化石墨烯有效提高PCR扩增效率的范围为9-14倍,提高PCR灵敏度一个数量级以及增加多轮PCR扩增中的两轮扩增反应.从原子力显微镜(Atomic force microscope,AFM)的结果可以看出,本文制备的氧化石墨烯片层厚度主要集中在0.5-0.8 nm,少数大于1 nm,总体具有较大的比表面积.除此之外,本文还发现当氧化石墨烯浓度到达μg· μL-1后,引物二聚体与氧化石墨烯的浓度呈正比,说明氧化石墨烯优化PCR的主要影响因素是其与引物的相互作用.

关键词: 氧化石墨烯 , 聚合酶链式反应 , 扩增效率 , 灵敏度 , 特异性

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