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离子对反相液相色谱同时测定家兔血浆中的外源性磷酸肌酸及其代谢产物肌酸

郗恒 , 韩国柱 , 吕莉 , 张迪

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.01000

建立了离子对反相高效液相色谱法( IP-RP-HPLC)同时测定家兔血浆中外源性磷酸肌酸(PCr)及其代谢产物肌酸(Cr)的方法,用于研究外源性PCr在家兔体内的药代动力学.以含离子对试剂四丁基硫酸氢铵(TBA)的磷酸盐缓冲液-甲醇为流动相,在Kromasil-C18色谱柱上进行梯度洗脱.采用内标法定量、以基线扣除法计算外源性PCr和Cr的浓度.PCr和Cr的线性范围分别为10 ~7 500 mg/L和10~1 500 mg/L;日内和日间精密度均≤6.2%,准确度分别为99.7% ~ 102.2%和96.5%~102.4%;萃取回收率均大于92%.静脉注射PCr后,血浆中PCr的消除为二室模型,消除半衰期为(20.4±2.7) min;表观分布容积为(0.179±0.037)L/kg;清除率为(0.019±0.002) L/(kg·min);静脉注射PCr后血浆中迅即出现降解产物Cr,其达峰时间为30 min;消除半衰期为(43.7±4.5) min.本方法的专属性强,准确度和精密度高,能特异性地测定家兔血浆中的PCr和Cr.实际应用结果表明,该方法完全符合PCr药代动力学生物分析方法学的要求.

关键词: 离子对反相高效液相色谱 , 药代动力学 , 磷酸肌酸 , 肌酸 , 家兔血浆

高效液相色谱法同时测定尿液中4种非蛋白氮的含量

马玉花 , 黄冬群 , 张瑞 , 徐世茹 , 封顺

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.07033

建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定尿液中4种常见的非蛋白氮物质——肌酸(Cr)、尿肌酐(Cn)、尿酸(Ua)及假尿嘧啶核苷(Pu)含量的方法.尿液首先经丙酮沉淀法除去大分子化合物,然后冷冻干燥,复溶后直接进行HPLC分析.色谱分离选用Waters RP18 Column(150 mm×4.60 mm,3.5 μm),以10.0 mmol/L磷酸缓冲溶液(pH 4.78)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,于220 nm波长下检测,可在7 min内完成4种非蛋白氮的快速分离分析.结果表明Cr、Cn、Ua、Pu在0.1~250 mg/L范围内线性关系均良好(相关系数均大于0.999),检出限分别为9.31、26.19、4.70、6.30 μg/L,加标回收率为81% ~ 111%,峰高的相对标准偏差(RSD,n=3)为0.23%~ 2.78%,满足定量要求.该法简便、快速,结果准确可靠,为2型糖尿病(T2DM)患者肾功能损坏的研究提供了检测手段.

关键词: 高效液相色谱法 , 肌酸 , 尿肌酐 , 尿酸 , 假尿嘧啶核苷 , 尿液

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