周宏兵
,
向日良夫
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.01.003
合成了一种用于醇类分析的高灵敏度的荧光衍生化试剂2-(4-羧基苯基)-4,5-萘并咪唑(CNI),将其在二氯甲烷中于80 ℃条件下与醇缩合成酯 ,并采用RP-HPLC法进行分离检测,色谱柱为Zorbax Bp C8柱(250 mm×4.6 mm i.d.) ,流动相为V(乙腈)∶V(甲醇)=90∶10的溶液,荧光检测波长λex 345 nm, λem 485 nm.同时,测定了人血清中的胆固醇,其最低检出质量浓度为1.0 μg /L.
关键词:
荧光衍生化试剂
,
高效液相色谱法
,
2-(4-羧基苯基)-4,5-萘并咪唑
,
醇类测定
贾绍栋
,
张美娜
,
金东日
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.007
以R(-)-4-N,N-二甲基磺酰胺-7-(3-异氰酸吡咯烷)-2,1,3-苯并氧杂咪唑(R(-)-DBD-PyNCS)为手性荧光衍生化试剂,成功地拆分了甲状腺素对映体D,L-四碘甲状腺原氨酸(T4)和L-三碘甲状腺原氨酸(T3).在反应温度为40℃、反应时间为20 min时,R(-)-DBD-PyNCS在碱性介质中可与甲状腺素对映体生成稳定的非对映体衍生物.该衍生物在以乙腈-水-醋酸(体积比为60:40:1)为流动相,流速为1.0 mL/min,色谱柱为Intersil@-ODS-3 C18柱(150 inm×4.6 ml,5μm)的色谱条件下得到了充分的分离.采用荧光检测器在激发波长460 nm、发射波长550 nm下检测.D,L-T4和L-T3分别在0.016～0.30μg/μL和0.006 7～0.22μg/μL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r>0.999).D,L-T4和L-T3)的最低检出限分别为0.02 μg/mL和0.85μg/mL(S/N=3).在D-T4、L-T4、L-T3质量浓度分别为0.10μg/μL下测得峰面积的相对标准偏差分别为3.40%,1.63%,3.30%(n=7).该方法成功地应用于甲状腺片中T4和T3的含量测定.
关键词:
高效液相色谱
,
荧光检测
,
柱前衍生化
,
荧光衍生化试剂
,
手性拆分
,
甲状腺素对映体
