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反相液相色谱-串联质谱法鉴定油菜蜂花粉中的蛋白质及活性肽

郭静 , 晏嘉泽 , 郭明 , 靳艳

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.12032

基于鸟枪法蛋白质组学分析方法,使用反相液相色谱-串联质谱(RPLC-MS / MS)系统分析油菜蜂花粉蛋白质的胰蛋白酶酶解产物,结合数据库检索,共鉴定到353条肽段。鉴定到的肽段所归属的蛋白质中有239个蛋白质可检索到其分子生物学功能,主要功能为结合活性、酶活性、运输活性、抑制活性等。根据血管紧张素转化酶( ACE)抑制肽活性与多肽构效之间的关系,从鉴定到的肽段中筛选并适当修饰后得到5条可能具有 ACE 抑制活性的肽段,化学合成肽段后进行了活性验证。结果表明5条肽段均具有良好的活性,其中肽段 AELDIVLALF 和 LAVN-LIPFP 表现出较高的 ACE 抑制活性,半数抑制浓度( IC50)分别为(10.65±0.50)μmol / L 和(23.66±1.08)μmol / L。该方法速度快,成本低,大大缩短了鉴定周期,达到了高通量筛选生物活性肽的目的。

关键词: 反相液相色谱-串联质谱 , 蛋白质 , 血管紧张素转化酶抑制肽 , 油菜蜂花粉

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