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纯钛表面PPy/rhBMP-2复合涂层对骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响

贾骏 , 段嫄嫄 , 张少锋 , 姚月玲 , 王忠义

稀有金属材料与工程

采用水溶液恒电流电化学聚合法在纯钛表面制备了聚吡咯/重组人骨形成蛋白涂层(Ti/PPy/rhBMP-2).利用循环伏安扫描分析涂层氧化还原性质,125I蛋白质标记法检测rhBMP-2掺杂量,表面粗糙度仪、扫描电子显微镜检测涂层微观形貌.通过对骨髓间充质干细胞(BMSCs)在Ti/PPy/rhBMP-2表面增殖、分化能力的检测,评价Ti/PPy/rhBMP-2对骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响.结果表明,rhBMP-2能够以聚电解质阴离子方式稳定地掺杂于PPy结构中,并且所生成的涂层表面粗糙度高且结构疏松.Ti/PPy/rhBMP-2中掺杂固定的rhBMP-2依然保持着其骨诱导活性,能够促进BMSCs的增殖、分化.

关键词: , 聚吡咯 , 骨形成蛋白 , 骨髓间充质干细胞

注射用人骨形成蛋白纳米微粒的制备与性质

吴道澄 , 万明习 , 张胜 , 吴红 , 胡蕴玉

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2002.07.001

用乳液聚合法制得注射用人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微粒,考察其体内外生物活性. 采用正交设计法优化制备工艺;用电子显微镜测定纳米微粒的形态和大小;紫外分光光度法测定rhBMP-2含量与包裹率;四唑盐比色法(MTT法)测定细胞增殖情况,用碱性磷酸酶(ALP)染色法测定rhBMP-2纳米微粒的生物活性. 结果表明rhBMP-2纳米微粒形态规整,平均粒径(107±12) nm,rhBMP-2的包裹率为78%. 4 ℃存放6个月生物活性无变化. 体外缓释试验表明纳米微粒中80%的rhBMP-2在前10 d释放,向培养基中加入rhBMP-2纳米微粒可以明显提高骨髓基质细胞(MSC)中的碱性磷酸酶水平且与rhBMP-2及空白对照有显著性差异(P<0.01). 说明注射用rhBMP-2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微粒生物活性好,具有确定的缓释作用,可作为注射性骨诱导制剂.

关键词: 骨形成蛋白 , 聚氰基丙烯酸正丁酯 , 包封 , 纳米微粒 , 骨生长诱导剂

骨形成蛋白-2转染MG-63细胞增加其对壳聚糖膜的粘附

范丽 , 卢岩 , 林慧平 , 姚航平 , 林军

材料科学与工程学报

为了观察壳聚糖膜对转染载有骨形成蛋白基因(bone morphogenetic protein,BMPDNA)的成骨样细胞(MG 63)粘附及增殖的影响,本研究构建重组BMP-2质粒并转染入MG 63,分别经酶切、PCR、Western、免疫组化鉴定;制备壳聚糖膜(chitosan,CS),然后将转染细胞与该材料分别培养1、3、5天,扫描电镜观察细胞在材料表面的粘附形态;24、48、72、96小时后MTS检测细胞的增殖情况。结果发现转染了BMP-2 DNA MG63在壳聚糖膜材料上形态生长良好,有利于细胞的粘附行为;96小时后与未转染细胞组相比无明显差异。结果表明虽然体外转染BMP-2的MG63的增殖没有明显促进作用,但有利于细胞与材料间的粘附。结论:BMP-2转染成骨细胞增加细胞壳聚糖膜间的粘附,这将有助于了解壳聚糖细胞复合材料临床骨再生的应用前景。

关键词: 骨形成蛋白 , 壳聚糖 , 成骨样细胞

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