蔡焕新
,
殷宝茹
,
姚萍
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.00637
为了得到低成本的多肽,本文利用胰蛋白酶对酪蛋白进行了充分的酶解.采用分析级反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(RP-HPLC/ESI-MS)分析了酶解产物各组分的组成,并通过改变流动相的梯度洗脱程序,优化了分析级色谱条件以充分分离相对含量较高的多肽组分;将优化的分析级色谱条件直接放大到制备级RP-HPLC中,在程序控制下通过紫外吸收信号结合ESI-MS信号共同引导实现了多肽的全自动化分离和收集.整个过程方便快捷,经过这样一个单一的分离步骤,得到了多个纯度较高的多肽.除此之外,本文还考察了流动相的酸碱性、柱上样量等因素对该体系制备级分离的影响,并对一次分离中分辨率不好的亲水性多肽混合物进行了二次分离,得到了多个新的多肽.本文建立的多肽制备方法为多肽和多肽材料的广泛应用提供了一种选择.
关键词:
高效液相色谱-电喷雾质谱法
,
制备级色谱
,
多肽
,
酪蛋白
,
蛋白酶
,
低成本
陈华
,
王丽
,
袁成凌
,
郑之明
,
余增亮
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.03.016
枯草芽孢杆菌JA因产生多种脂肽类化合物而具有广阔的开发前景.JA发酵液经过离心、酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到脂肽类化合物的粗提物.将粗提物溶于流动相,采用反相高效液相色谱分离,对收集的洗脱峰组分进行电喷雾质谱(ESI-MS)分析.根据质荷比推断JA菌株产生的脂肽类化合物属于3个家族,分别为surfactin, iturin和fengycin,是枯草芽孢杆菌合成的重要生物表面活性素.对一级质谱中的主成分进行串联质谱分析,进一步确定了3种脂肽类化合物的分子结构.实验证明ESI-MS是一种鉴定脂肽类化合物及其同系物的可靠方法.
关键词:
高效液相色谱-电喷雾质谱法
,
枯草芽孢杆菌
,
脂肽类化合物
卢亚玲
,
陈继涛
,
陈波
,
姚守拙
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.01.008
建立了降血压保健食品中8种违禁添加成分的高效液相色谱-电喷雾质谱联用(HPLC-ESI/MS)测定方法.采用Spherigel C18反相色谱柱,以0.005 mol/L甲酸铵缓冲盐(pH 3.0)-乙腈-甲醇为流动相,梯度洗脱,质谱定性定量.在该条件下,以西力士为内标,ESI+模式下的最低枪出限(LOD)为2.5μg/L;ESI-模式下的最低检出限为50μg/L;回收率为63.3%～107.4%.该方法的样品处理简单,结果准确,重现性好,选择性及灵敏度高,适用范围广,可用于降压类药物及保健食品中违禁成分的检测.
关键词:
高效液相色谱-电喷雾质谱法
,
违禁成分
,
降血压保健食品
