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高效液相色谱-荧光检测流速梯度法测定去卵巢小鼠脑内单胺类神经递质

张雷 , 卢英俊 , 邓同乐 , 郑筱祥

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.016

建立了同时检测去卵巢(OVX)小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法.采用的色谱条件为:C18柱分离,荧光检测器检测,流动相为0.1 mol/L的KH2PO4缓冲液-甲醇(体积比为9:1),设置单泵流速梯度洗脱.方法的检测限(S/N=3)均在10 nmol/L以下,绝对回收率均在80%以上,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.03%以下.该方法具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值.

关键词: 高效液相色谱 , 流速梯度 , 去甲肾上腺素 , 多巴胺 , 5-羟色胺 , 去卵巢小鼠

高效液相色谱法测定大鼠给药盐酸氟西汀后脑渗析液中的5-羟色胺

郭云珍 , 于莉 , 马郑 , 郭兴杰

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.02.017

建立了高效液相色谱柱前衍生化法测定大鼠腹腔注射(i.p.)给药盐酸氟西汀前后脑渗析液中5-羟色胺(5-HT)的浓度变化情况.在大鼠给药盐酸氟西汀前和给药后不同时间点取其脑渗析液,加入衍生化试剂反应后,以乙腈-20 mmol/L醋酸盐缓冲液(pH 5.0)(体积比为45:55)(含20 mmol/L辛烷磺酸钠)作为流动相,在HypersilC18色谱柱(250 mm×2.0 mm,5μm)上进行分离,荧光检测波长为λex=330 nm,λem=455 nm.5-HT在浓度为0.25～5.0 nmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 1);5-HT的最低定量限为0.25 nmol/L.本法准确可靠、简便,适用于生物样品中5-HT的浓度测定.

关键词: 柱前衍生化 , 高效液相色谱 , 荧光检测 , 5-羟色胺 , 盐酸氟西汀

鼠脑组织中 6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉及其相关生物胺的高效液相色谱-电化学检测

毛健 , 苏晻 , 栾玉静 , 陈薛钗 , 邓玉林

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.02.017

建立了大鼠脑组织中 6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉(6-OH-MTHβC)、5-羟色胺(5-HT)和 5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的高效液相色谱-库仑阵列电化学检测(HPLC-ECD)方法.采用的色谱柱为DiscoveryHS F5柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为缓冲液(40 mmol/L柠檬酸+20 mmol/L磷酸氢二钠+0.3 mmol/L乙二胺四乙酸二钠,pH 4.0)-甲醇(体积比为78∶22)混合液,流速为1 mL/min.6-OH-MTHβC、5-HT、5-HIAA在1.0～500.0 μg/L范围内线性关系良好(r>0.9992),检出限分别为0.56,0.26,0.53 μg/L,日内和日间精密度(以相对标准偏差表示)均低于6.1% ,回收率分别为87.1% ～98.2% ,87.0% ～95.3% ,90.1% ～97.7% .用该方法检测新生 7 d 的SD胎鼠脑内6-OH-MTHβC及5-HT、5-HIAA的含量,发现SD胎鼠在急性酒精中毒 8 h 后6-OH-MTHβC显著上升(P<0.05);而5-HT和5-HIAA的含量有所下降,但无显著性差异.该法简便、稳定、灵敏度高,适用于测定鼠脑组织中6-OH-MTHβC和5-HT,5-HIAA含量的相关研究.

关键词: 高效液相色谱 , 电化学检测 , 6-羟基-1-甲基-1,2,34-四氢-β-咔啉 , 5-羟色胺 , 5-羟吲哚乙酸 , 鼠脑

纳米纤维固相萃取-高效液相色谱法测定血浆中的5-羟色胺

周小玲 , 王羽 , 陈利琴 , 康学军

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.01107

基于纳米纤维的富集作用,建立了血浆中5-羟色胺(5-HT)的柱前衍生高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)分析方法.用10%(v/v)高氯酸溶液沉淀血浆蛋白,离心后取上清液,用0.1 mol/L 的四苯硼酸钠溶液调节pH值至8.5,加入衍生剂邻苯二甲醛溶液于30 ℃衍生4 min,经纳米纤维固相萃取柱净化富集后,以pH 5.4的0.05 mol/L 磷酸二氢钾缓冲液(含0.25 mmol/L 乙二胺四乙酸)-甲醇(60∶40,v/v)为流动相在C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)上进行分离,进样量为20 μL.结果表明,在高、中、低3个加标水平下,血浆中5-HT的加标回收率为95.6% ～101.4%,日内与日间相对标准偏差均小于5%(n=3).方法的定量线性范围为5～500 μg/L,检出限为1 μg/L.该方法操作简单、快速,具有较高的灵敏度和较高的重现性,能够用于血浆中5-HT的含量测定.

关键词: 纳米纤维 , 固相萃取 , 高效液相色谱 , 5-羟色胺 , 血浆

高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物

甄乾娜 , 黄小兰 , 张晓清 , 班艳娜 , 丁敏

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00435

建立了一种高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中色氨酸(Trp)及其主要代谢产物犬尿氨酸(Kyn)和5-羟色胺(5-HT).以茶碱为内标(IS),采用BDS-Hypersil-C8柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离.流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液(pH 4.5)-乙腈(94:6,v/v),流速为0.6 mL/min;柱温为25℃;紫外检测波长设定:Kyn和IS为360 nm,5-HT为220 nm,Trp为302 nm.3种物质的平均回收率为87%～113%;线性范围分别为3.97～400 μmol/L(Trp),0.421～20.2 μmol/L(Kyn),4.36～980 nmol/L(5-HT);检出限分别为0.134 μmol/L(Trp),0.0160 μmol/L(Kyn),2.03 nmol/L(5-HT).利用该方法对15例抑郁症患者和15例健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp的代谢存在显著的差异.

关键词: 高效液相色谱法 , 色氨酸 , 犬尿氨酸 , 5-羟色胺 , 血浆

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