刘庆业
,
范燕燕
,
凌绍明
,
温桂清
,
梁爱惠
,
康彩艳
,
蒋治良
冶金分析
doi:10.3969/j.issn.1000-7571.2010.04.012
用适体(aptamer)修饰6 nm金纳米粒子制备了检测铅离子的核酸适体-金纳米粒子探针.在pH 7.O的Na_2 HPO_4-NaH_2PO_4缓冲溶液及NaCl介质中,该探针亦不聚集.Pb~(2+)与探针中的aptamer可形成非常稳定的G-四分体结构,并释放出金纳米粒子.在NaCl作用下,释出的金纳米粒子聚集形成较大的金纳米粒子聚集体,导致516 nm处的吸光度降低.Pb~(2+)浓度在0.3～10 nmol/L范围与516 nm处吸光度降低值呈线性关系,其线性回归方程为△A=0.0260 ρ+0.01,相关系数为0.994 3,方法检出限为0.1 nmol/L Pb~(2+).该法用于废水样分析,结果与石墨炉原子吸收光谱法一致.
关键词:
铅(Ⅱ)
,
适体
,
金纳米粒子
,
光度法
陈尔凝
,
赵新颖
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.12021
核酸适配体（ aptamer）是通过指数富集配体系统进化技术（ SELEX）筛选的能够以高亲和力和高特异性识别靶标分子或细胞的核糖核酸（ RNA）和单链脱氧核糖核酸（ ssDNA）。作为化学抗体，核酸适配体的制备和合成比抗体的成本更低。核酸适配体的靶标范围极其广泛，包括小分子、生物大分子、细菌和细胞等。针对细菌靶标筛选的适配体，目前主要应用于食品、医药和环境中的细菌检测。细菌的核酸适配体筛选可以通过离心法将菌体-适配体复合物与游离的适配体分离，并通过荧光成像、荧光光谱分析、流式细胞仪分选、DNA捕获元件、酶联适配体分析等方法表征适配体与靶标的相互作用。筛选出的适配体可结合生物、化学检测方法用于细菌检测。本文介绍了细菌适配体的筛选和表征方法以及基于适配体的检测方法的最新进展，分析了不同检测方法的利弊，并列出了2011～2015年筛选的细菌的核酸适配体。
关键词:
核酸适配体
,
细菌
,
筛选
,
指数富集配体系统进化技术
,
综述
王勇
,
赵新颖
,
石冬冬
,
杨歌
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.05001
核酸适配体（aptamer）是通过指数富集配体系统进化（SELEX）技术筛选得到的核糖核酸（RNA）或单链脱氧核糖核酸（ ssDNA）。核酸适配体通过高亲和力特异性地识别小分子、蛋白质、细胞、微生物等多种靶标，在生物、医药、食品和环境检测等领域的应用日渐增多。但目前实际可用的核酸适配体有限，其筛选过程复杂，筛选难度大，制约了其应用。与生物大分子、细胞和微生物等靶标不同，小分子靶标与核酸分子的结合位点少、亲和力弱，且靶标通常需要固定在载体上。此外，小分子靶标结合核酸形成的复合物与核酸自身的大小、质量、电荷性质等方面差异较小，二者的分离难度大。故小分子靶标的核酸适配体筛选过程与大分子和细胞等复合靶标相比有明显差异，筛选难度更大。因此需要根据其自身结构特点和核酸适配体的应用目的选定靶标或核酸库的固定方法，优化靶标核酸复合物的分离方法。本文介绍了不同类型小分子（具有基团差异的单分子、含相同基团分子和手性分子等）靶标的选择及其核酸适配体的筛选方法，并对核酸库的设计、与靶标结合的核酸的分离方法和亲和作用表征方法进行了介绍，列出了自2008年以来报道的40余种小分子靶标的核酸适配体序列和复合物的平衡解离常数（Kd）。
关键词:
核酸适配体
,
小分子靶标
,
筛选
,
综述
杨歌
,
魏强
,
赵新颖
,
屈锋
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.12014
核酸适配体是通过指数富集系统配体进化（ SELEX）筛选获得的，与靶标具有高亲和力和特异性结合的单链DNA或 RNA。蛋白质是生命进程中的关键功能分子。近年来，以蛋白质为靶标的适配体筛选在蛋白质相关的基础及应用研究领域受到广泛关注。核酸适配体应用性能的优劣取决于其亲和力、特异性与稳定性。目前，适配体筛选方法的优化主要是提高筛选效率、提升适配体性能及降低筛选成本。适配体主要筛选步骤包括复合物分离、核酸库优化、次级库的富集、适配体序列分析以及亲和力表征等。迄今为止，以蛋白质-核酸复合物的分离为核心步骤的适配体筛选方法有20余种。本文归纳总结了2005年以来以蛋白质为靶标的适配体筛选技术，讨论了各方法的缺陷与局限。介绍了核酸库的设计优化方法、适配体的序列特征，以及常用的亲和力表征方法。
关键词:
核酸适配体
,
蛋白质
,
筛选
,
指数富集系统配体进化
,
综述
贾向阳
,
尤慧艳
,
付秀丽
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2016.10007
基于聚阳离子鱼精蛋白与带负电的核酸适配体以及金纳米粒子之间的静电作用,发展了一种生物纳米检测技术,用于卡那霉素的检测;优化了缓冲溶液中阳离子、鱼精蛋白以及核酸适配体浓度,结果表明在20 mmol/L Na+、1 mmol/L Mg2+、2 mg/L 鱼精蛋白、100 nmol/L 核酸适配体条件下,卡那霉素在5~5 000 nmol/L 范围内与金纳米粒子的吸光度比值呈现良好的线性关系,相关系数(R2)为 0.992 8,方法的检出限为0.53 nmol/L.在此实验条件下,检测了牛奶中卡那霉素的含量,回收率为96%~98%,相对标准偏差为1.5%~3.2%.该方法选择性高,灵敏度好,线性范围广,显示出其应用于食品中卡那霉素检测的优势.
关键词:
鱼精蛋白
,
核酸适配体
,
金纳米粒子
,
纳米生物
,
卡那霉素
,
牛奶
杨绍明
,
查文玲
,
孙清
,
李红
,
李瑞琴
,
尚培玲
应用化学
doi:10.3724/SP.J.1095.2014.30416
在玻碳电极(GCE)表面首先用增敏作用的多壁碳纳米管(MWCNTs)夹心于两层电沉积的铁氰化镍(NiHCF)氧化还原电化学探针之间,然后以金纳米粒子为固定核酸适配体的载体,构建了检测凝血酶的非标记型核酸适配体生物传感器.利用扫描电子显微镜(SEM)对MWCNTs和NiHCF的形貌进行了表征.利用电化学阻抗谱对传感器的组装过程进行了监测,用循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)对传感器的电化学行为进行了研究.以铁氰化镍为探针的传感器对凝血酶的检测在1.0 ng/L～1.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,检测限为0.2 ng/L(S/N=3).
关键词:
铁氰化镍
,
核酸适配体
,
凝血酶
,
传感器
李辉彦
,
白效静
,
王风红
,
李静
,
唐纪琳
应用化学
doi:10.11944/j.issn.1000-0518.2015.03.140437
基于适配子构建了无标记检测三磷酸腺苷(ATP)的微悬臂梁生物传感器.将ATP适配子修饰在微悬臂梁阵列中的传感悬臂镀金面上,用来识别ATP,而参比悬臂修饰巯基己醇(MCH)防止非特异性吸附.ATP与其适配子发生特异性相互作用,使悬臂的上下两个表面产生应力差,导致传感悬臂产生偏转,扣除参比悬臂偏转后其偏转值与ATP的浓度在0.5～5 mmol/L范围内有良好的线性关系,相关系数为0.998,最低检出限为0.06 mmol/L.该微悬臂梁生物传感器响应快速、操作简单,并且对ATP具有良好的特异性.
关键词:
三磷酸腺苷
,
适配子
,
微悬臂梁生物传感器
,
表面应力
