周蓉
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曹赵云
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牟仁祥
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李正翔
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陈铭学
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.09024
建立了水稻中半胱氨酸(Cys)、谷胱甘肽(GSH)和植物螯合肽(phytochelatin,PC:PC2、PC3、PC4、PC5、PC6)7种巯基化合物的柱前衍生高效液相色谱-荧光检测分析方法。样品经0.1%三氟乙酸( TFA)(含6.3 mmol/L 二乙烯三胺五乙酸(DTPA))超声提取,然后以单溴二胺(mBrB)为衍生剂在 pH 8.0的4-羟乙基哌嗪丙磺酸(HEP-PS)缓冲溶液中衍生化。采用的色谱分离柱为 Agilent Eclipse plus Cl8柱,流动相为0.1%TFA(pH 2.5)和100%乙腈( ACN),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min。荧光检测的激发波长和发射波长分别为380 nm 和470 nm。结果表明,7种巯基化合物在0.7~100.0 mg/L范围内,峰面积与质量浓度之间的线性关系良好( r2≥0.9991);检出限为0.03~0.20 mg/L;加标回收率为89.26%~99.42%,相对标准偏差为2.05%~5.87%。该方法准确、灵敏度高、重现性好,为水稻中巯基化合物的研究提供了检测手段。
关键词:
柱前衍生
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高效液相色谱法
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巯基化合物
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水稻